个中间产物,然后中间产物分解成产物和游离的酶。РE+SРESРE+PР第四页,共32页РР中间产物学说的证据:?1 电子显微镜观察到了核酸聚合酶与核酸结合而成的复合物,X晶体衍射:羧肽酶A和底物Gly-L-Tyr相互作用;?2 根据酶和底物反应前后的光谱变化,可证明中间产物的存在;?3 酶的物理特性在形成复合物后发生变化;?4 已分离到酶和底物相互作用生成的ES复合物;乙酰化胰凝乳蛋白酶D-氨基酸氧化酶和底物复合物的结晶;?5 超离心沉降过程中,酶和底物共沉降。Р第五页,共32页РР发展的中间产物学说:酶先与底物结合成酶-底物复合物(ES),然后转变成过渡态(ES*),再形成酶-产物复合物(EP),最后分解释放出酶,并生成产物。РE+SРESРES*РEPРE+PР第六页,共32页РРРРS*РES*РESРEPРE+PРPРEa(酶促反应)РE+SРSРEa(非酶促反应)Р自?由?能Р(非酶促反应)Р△G ○Р反 应 进 行 方 向РSРS *РPР第七页,共32页РР三 与酶的高效率催化有关的因素Р(一)底物和酶的“趋近” 和“定向”效应Р趋近效应:指两个反应的分子,它们反应的基团需 ? 要互相靠近,才能反应。 ?定向效应: 指酶的催化基团与底物的反应基团之间? 的正确定向。Р第八页,共32页РР趋近:指底物的反应基团和酶活性部位的催化基团互相靠近,以及结合在酶活性部位上的两种底物分子之间的互相靠近。Р底物分子浓集于酶活性中心,有利于分子相互碰撞而发生反应。Р第九页,共32页РР定向:指互相靠近的底物分子之间、底物分子与酶活性部位的催化基团之间形成正确的立体排列方向。Р邻近效应与定向效应在双分子反应中起促进作用至少可分别达104倍,两者共同作用可使反应速率提高108。Р第十页,共32页