中固定,石蜡包埋,制成蜡块。每个标本蜡块切片,留做苏木精.伊红(既)染色、Von Kossa染色(钙染色)。 7 硕上研究生学位论文转化生长因子.9。和强力霉素在大鼠动脉钙化模型中的作用及意义 6、病理: 蜡块组织切片厚度49m,苏木精一伊红(肥)染色。 HE染色步骤: (1)二甲苯脱蜡10分钟。(2)水化(95%酒精、85酒精、75酒精各2分钟)。(3)苏木素染色5分钟。(4)自来水冲洗2分钟。(5)1%的盐酸酒精分化3秒钟。(6)自来水冲洗2分钟。(7)伊红染色2分钟。(8)自来水冲洗5分钟。(9)梯度酒精脱水,晾干后中性树胶封片。另切片做Von Kossa染色(钙染色),具体方法如下: (1)切片脱蜡至水。(2)切片用蒸馏水冲洗一次。(3)滴加1滴(10091)硝酸银(试剂A)于切片上,置于强光下作用 60分钟。(4)蒸馏水洗5分钟。(5)滴加1滴(1 0091)硫代硫酸钠(试剂B)处理2分钟,流水冲洗 1O分钟。(6)苏木素衬染1分钟,流水冲洗1 O分钟。(7)伊红染色1分钟,直接进入95%酒精洗涤分化,无水酒精脱水、透明、封固。 8 硕上研究生学位论文转化生长因子.Bl和强力霉素在大鼠动脉钙化模型中的作用及意义结果大鼠动脉钙化模型制作成功。实验组三组大鼠共死亡八只(试验一组2 只,试验二组和三组各3只)舍去不用。实验组动脉标本做胍染色和Von Kossa染色证实动脉发生钙化,对照组未发生钙化,而抑制组发现钙化局限于管壁,范围较实验组明显减小。镜下观察:实验组HE染色,动脉中层弹力纤维破坏并造成断裂,制片时部分钙盐脱落,形成空白区域;对照组动脉中层完整;抑制组动脉中层部分破坏较实验组明显减少。实验组Von Kossa染色,可见大量片状连续的钙盐沉积在动脉中层(黑色物质)并有组织断裂;对照组动脉中层完好无损;抑制组可见钙盐沉积范围较实验组明显缩小,呈点状或小片状。 9
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