度计上测定D645、D663、D470。按以下公式计算叶绿素含量: Р叶绿素 a (mg·g- 1) = (12. 7 × D663- 2. 69 × D645×v / (1 000 × w); 叶绿素 b ( mg·g- 1) = (22. 9 ×D645- 4. 68 × D663) × v / (1 000 × w);Р总叶绿素(CT)=Ca+CbР类胡萝卜素(Cx.c)=1000A470-3.27Ca-104C3/229 v / (1 000 × w)。Р其中: v 为提取液的体积(mL); w 为所取样品的鲜重(g)Р可溶性糖:Р采用恩酮比色法。吸取提取液 0. 5 mL 于 20 mL 刻度试管中(重复 3 次),加蒸馏水 1. 5 mL,再加 0. 5 mL蒽酮乙酸乙酯试剂和 5 mL 浓 H2SO4,充分振荡,立即加入沸水浴中准确保温 1 min,自然冷却至室温,以空白(2 mL 水+ 0. 5 mL 蒽酮乙酸乙脂+ 5mL 浓 H2SO4) 作参比,630 nm 比色,测定吸光度,并通过标准曲线计算可溶性糖的含量。Р超氧化物歧化酶(SOD):Р提取酶液Р称取叶或花0.200g,于预冷的研钵,加预冷的磷酸缓冲液,(PH=7.8),在冰浴上研磨,转移至离心管,总体积为1.5ml。4度,10000r/min,离心20min.上清液为酶粗提取液。Р显色反应Р5ml试管4支,2支为测定管,2支为对照管,在测定管加,0.05mol/l磷酸缓冲液3ml,130mmol/lMet0.6,750umol/lNBT0.6,100ummol/lEDTA-Na2,20umol/l核黄素0.6mol/l,蒸馏水0.5,酶液0.1.两支对主管,加磷酸缓冲液0.1.总体积6.0mL。Р混合均匀,1支对主管置暗处,另两支放4000lx日光下反应20min ,25度。РSOD活性测定与计算
全文预览
