颜色稍微变浅;此步显色反应证明有芦丁的存在,但无法证明是否有槲皮素存在。因芦丁溶液加ZOCl2后颜色加深(5-OH存在),加入柠檬酸后颜色变浅;槲皮素加ZOCl2后颜色加深(5-OH、3-OHC存在),加入柠檬酸后颜色变化不明显,由于颜色掩盖效应,不可排除两同时存在。а-萘酚反应(糖的检测):取上述溶液1-2ml,然后再加10%а-萘酚乙醇溶液2-3滴,摇匀,沿管壁缓缓加入浓硫酸1ml,观察到一层出现紫红色,一层为淡黄色接近无色,说明既有芦丁存在又有槲皮素存在即部分芦丁水解。3.3.2薄层色谱检识样品溶液的处理:称取芦丁提取物20mg,加入甲醇10ml使配制成溶液;对照品溶液的处理:取芦丁对照品,加甲醇制成每1ml含2mg的溶液,作为对照品溶液。吸附剂:自制硅胶G-CMC版展开剂:乙酸乙酯-甲酸-水(8:1:1)薄层测定:用毛细管取供试品、对照品溶液各10μL,分别点于自制的硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-甲酸-水(8:1:1)为展开剂,展开,一段时间后取出,再晾干,待晾干后喷三氯化铝试剂,等乙醇挥发完全后置于紫外光灯(365nm)下检视。在本实验中,观察到供试品色谱上的荧光斑点与对照品色谱的荧光斑点出现的位置相一致。从而证明了样品中芦丁的存在即芦丁没有全部水解。3.4芦丁的含量测定3.4.1对照品溶液的制备精密秤取在120°C五氧化二磷减压干燥恒重控制的芦丁对照品20mg,至50ml容量瓶中,加适量60%乙醇,超声波处理使溶解,放冷,加60%乙醇至刻度,摇匀。精密量取25ml至50毫升容量瓶中,加60%乙醇至刻度,摇匀,即得(每1ml中含无水芦丁0.2mg)。3.4.2标准曲线的制备(1)精密量取对照品溶液(0.2mg/ml)1.00,2.00,3.00,4.00,5.00,6.00分别放在25ml容量瓶中,各加入30%乙醇至6.0ml,各精密加入5%亚硝酸钠1.0ml,充分
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