lmpus激光共聚焦荧光显微镜数码相机(佳能)3.2实验试剂一抗:NCL-CK5抗体(鼠抗人、克隆号:XM26、Leicabiosystems),CD3(小鼠抗人、BM0210、博士德生物公司),CD68(兔抗人、BA3639、博士德生物公司)。二抗:DakoREAL™EnVision™试剂盒(K5007)(A瓶:DakoREAL™EnVision™/HRP,Rabbit/Mouse;B瓶:Buffer;C瓶:DAB显色剂),荧光标记试剂:TRITC-羊抗兔IgG(ZF0316、1:200、飞羿科技公司),TRITC-羊抗小鼠IgG(ZF0313、1:200、飞羿科技公司)其他试剂:DAPI封片剂(ZLI-9557、FlurorescentMountingMediumwithDAPI、中杉金桥),二甲苯,梯度乙醇(80%、95%、100%),柠檬酸盐缓冲液(PH6.0),3%过氧化氢溶液,3%BAS,PBS,苏木素,水溶性伊红Y,1%稀盐酸,蒸馏水,自来水,中性树胶。4.使用的软件SPSS17.0统计软件FV10-ASW2.1Viewer软件AdobePhotoshopCS5软件GraphPadPrism5.0Demo软件5.研究方法5.1收集临床资料回顾性统计了2012年1月至2014年7月在华中科技大学附属同济医院皮肤科就诊的39例PCA患者及2013年1月至2014年7月在华中科技大学附属同济医院皮肤科就诊的5例LP和5例LE患者的临床资料。5.2标本处理5.2.1取得正常皮肤组织2例后,立即按常规程序处理:10%中性福尔马林溶液中固定24小时、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片(4µm连续切)。每例标本切2张。5.2.239例PCA和10例对照病例石蜡包埋组织直接进行4µm连续切片,每例标本连续切片5-6张;切完后切片均放在烤箱中65℃1h,取出室温保存备用。HE染色方法
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