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幽门螺杆菌ureb,oipa基因的克隆表达及其免疫原性的初步研究

上传者:苏堤漫步 |  格式:docx  |  页数:69 |  大小:3303KB

文档介绍
公司。(3)DNA片断回收试剂盒及质粒小提试剂盒购自北京鼎国生物有限公司。(4)蛋白分子量标准购自Sigma公司。Р3.主要化学试剂(1)十二烷基磺酸钠(SDS)、溴化乙锭(EB)购自8iorad公司。(2)琼脂糖凝胶购自Biowest公司。Р(3)丙烯酰胺、N,N~亚甲基双丙烯酰胺、TEMED、B一巯基乙醇购自Sigma公司。(4)其它常用化学试剂为国产分析纯。Р4.培养基及选择添加剂(1)酵母浸膏、蛋白胨琼脂粉购自Oxide公司。(2)脑心浸液培养基购自BD Defico公司。(3)DEMEM购自Sigma公司。Р9Р中国协和医科大学中国医学科学院硕士研究生毕业论文Р(4)幽门螺杆菌选择性添加剂购自Oxide公司。(5)无菌脱纤维羊血购自昆明医学院动物科。Р5.免疫学相关试剂(1)小鼠抗GST抗体购自北京天为时代生物有限公司(2)羊抗小鼠玲G购自武汉博士德生物有限公司Р6.实验动物(1)新西兰大白兔,2.2—2.7Kg,购于昆明医学院动物科。(2)ICR小鼠,6周龄,雌性,18~229,购于昆明医学院动物科。Р7.主要仪器Р(1)PCR扩增仪,Perkin Elmer公司产品。(2)高速冷冻离心机,Eppendorf公司产品。(3)Hoefer蛋白电泳仪,Pharmacia公司产品。(4)水浴、空气浴摇床,江苏太仓实验仪器厂产品。(5)超声波破碎仪、紫外检测仪,以及各型电泳槽,北京六一实验仪器厂产品。Р8.其它Р(1)5%H2,10%C02,85%N2 V,v混合气体购自昆明梅赛尔公司。(2)真空缸购自江苏盐城玻璃制品有限公司。(3)真空密封胶购自上海真空密封设备厂。Р(=)实验方法 1.}岫的培养(1)幽门螺杆菌的体外培养Р气体和温度:与体内胃粘液层下的条件相似,即5%的氧气(微需氧)和37Р℃,但这两个参数并非绝对,用真空泵将培养缸内气压抽至0或者接近0,立即Р10

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