象①单细胞培养②原生质体培养2、按培养基分①固体培养②液体培养3、按培养方式①摇瓶悬浮培养②固定化细胞培养原生质体的分离:植物体的幼嫩部分、疏松易碎的愈伤组织或悬浮培养的细胞是制备原生质体的理想材料①酶解材料的准备②材料的预处理③酶解④原生质体的纯化⑤原生质体活力的测定原生质体活力的测定:①目测法②二乙酸荧光素(FDA)法③酚藏红花染色法植物细胞工程在食品工业中的应用?1、植物细胞培养2、植物原生质体培养和细胞融合3、植物细胞染色体工程4、其他植物细胞技术工程5、植物细胞工程在食品工业的应用蛋白质工程:是以蛋白质结构、功能研究为基础,运用生物化学、分子生物学、遗传工程的方法,借助计算机信息处理技术的支持,从改变或合成编码蛋白的基因入手,定向地改造天然蛋白质或设计全新的人工蛋白质分子,使之具有特定的结构、性质和功能,能更好地为人类服务的一种生物技术。蛋白质工程的基本研究内容:①从预期的蛋白质功能出发②设计预期的蛋白质结构③推测应用的氨基酸序列④找到相应的脱氧核苷酸序列蛋白质的研究内容:是以蛋白质结构和功能关系的知识为基础,通过周密的分子设计把蛋白质改造为有预期的新特征的突变蛋白质,在基因水平上对蛋白质进行改造按改造的规模和程度可以分为:初级改造、高级改造、从头设计合成新型蛋白质。初级改造:个别氨基酸的改变和一整段氨基酸序列的删除、置换或插入。蛋白质工程研究中主要采用的基因突变方法包括:基因定位突变、盒式突变含有单一或少数几个突变位点的基因定向改变可以采用:①M13-DNA寡聚核苷酸介导诱变技术②寡核苷酸介导的PCR诱变技术③随机诱变技术④盒式突变技术高级改造:蛋白质分子的剪裁,如结构域的拼接蛋白质工程在食品工业中的应用:1、提高蛋白质和酶的热稳定性2、改良蛋白质或酶的pH稳定性3、改良蛋白质的氧化稳定性4、提高酶的催化活性5、修饰酶的催化特异性6、修饰Nisin的生物防腐效应
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