,按沙∶土=2∶1混合.把混匀地沙土分装入安瓿管或小试管中,高度为1厘米左右.塞好棉塞,0.1MPa灭菌30分钟,或常压间歇灭菌3次,每天每次1小时.灭菌后在不同部位抽出若干管,分别加营养肉汁、麦芽汁、豆芽汁等培养基,经培养检查后无微生物生长方可使用.个人收集整理勿做商业用途斜面培养物地制备参照附录A.制备菌悬液向培养好地斜面培养物中注入3mL-5mL无菌水,洗下细胞或孢子制成菌悬液.用无菌吸管吸取菌悬液,均匀滴入沙土管中,每管0.2mL-0.5mL.放线菌和霉菌可直接挑取孢子拌入沙土管中.个人收集整理勿做商业用途干燥用真空泵抽去安瓿管中水分并放置于干燥器内.纯培养检查从做好地沙土管中,按10∶1比例抽查.无菌条件下用接种环取出少量沙土粒,接种于适宜地固体培养基上,培养后观察其生长情况和有无杂菌生长.如出现杂菌或菌落数很少,或根本不长,则须进一步抽样检查.个人收集整理勿做商业用途保藏将纯培养检查合格地沙土管用火焰熔封管口.制好地沙土管存放于低温(4℃-15℃)干燥处,半年检查一次活力及杂菌情况.也可将纯培养检查合格地沙土管直接用牛皮纸或塑料纸包好,置干燥器内保存.用此方法保藏时间为2-10年不等.个人收集整理勿做商业用途复活复活时在无菌条件下打开沙土管,取部分沙土粒于适宜地斜面培养基上,长出菌落后再转接一次,也可取沙土粒于适宜地液体培养基中,增殖培养后再转接斜面.个人收集整理勿做商业用途参考文献[1]中国科学院微生物研究所.菌种保藏手册[M].北京:科学出版社,1980[2]杜连祥.工业微生物学实验技术[M].天津:天津科学技术出版社,1992[3]诸葛健,王正祥.工业微生物实验技术手册[M].北京:中国轻工业出版社,1994[4]杜连祥.乳酸菌及其发酵制品生产技术[M].天津:天津科学技术出版社,1999[5]姜成林,徐丽华.微生物资源学[M].北京:科学出版社,1997
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