阳还五汤处理对照组(n=150):用预初实验选定的补阳还五汤剂量处理动物4)地塞米松处理对照组(n=150):用地塞米松处理动物5)PQ+补阳还五汤治疗组(n=150):同百草枯模型组造模。以后用预初实验选定的补阳还五汤剂量处理动物6)PQ+地塞米松治疗组(n=150):同百草枯模型组造模。以后用地塞米松处理动物7)PQ+小剂量DXM+小剂量补阳还五汤治疗组(n=150):同PQ模型组造模。以后用相当于第4)组半量的地塞米松(5mg/kg)和第3)组半量的补阳还五汤处理动物(2)再根据造模后不同的给药时间点,将每组再分为A、B、C、D、E五个亚组,每组五个亚组,每组30只:A:当日给药组B:7天给药组C:14天给药组D:28天给药组E:56天给药组(3)最后将每个亚组再根据给药后观察时间长短分为3组,每组10只。2、观察项目:(1)动物存活率(2)肺组织病理标本:1)大体标本观察:各组肺组织的大小、颜色、弹性、胶原形成情况等2)病理切片观察:a、HE染色,光镜下观察肺泡炎症和纤维化程度,特别关注成纤维细胞灶形成情况;b、透射电镜观察细胞形态学变化;c、采用RT-PPCR技术观察肺组织病理及转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA,Smad3mRNA的表达。d、相关细胞因子表达情况:用免疫组化方法检测肺组织标本中MMP-9/TIMP-1和TGF-β/INF-γ的表达情况,以反映体内致纤维化和抗纤维化细胞因子的平衡情况e、肺组织匀浆羟脯氨酸(HYP)含量测定:反应肺组织纤维化程度3、分析总结根据上述研究结果,分析总结补阳还五汤是否能减轻搏莱霉素致动物肺纤维化,以推测将来能否用于人类百草枯中毒致肺纤维化的治疗【技术路线】体内实验对实验数据分析,得出结论。分组实验撰写论文,学术交流正式实验阶段预除实验阶段综合分析体内、体外研究结果,选择动物存活率最高,治疗效果最好的剂量组。体外实验
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