在染菌的隐患和死角Р 4,从染菌的时间来分析Р 发酵早期染菌:种子带菌、培养基和设备灭菌不彻底、设备或管道有死角Р 中、后期染菌:中间补料、设备渗漏、操作不合理Р 5,从染菌的类型来分析Р 耐热性芽抱杆菌:死角或灭菌不彻底Р 球菌、酵母:可能是从蒸汽的冷凝水或空气中带来的Р 浅绿色菌落(革兰氏阴性杆菌) :发酵罐的冷却管或夹套渗漏Р 霉菌:灭菌不彻底或无菌操作不严格Р 四、染菌情况分析Р 染菌的原因有多种,对于实际情况如何分析呢?Р 1、单罐染菌Р 不是系统问题,而是该罐本身的问题。如种子带菌、培养基灭菌不彻底、罐有渗漏、分过滤器失效Р 2、多罐染菌Р 系统问题,如空气过滤系统有问题,特别是总过滤器长期没有检查,可能受潮失效;移种或补料的分配站有渗漏或灭菌不彻底Р 3、前期染菌Р 种子带菌、培养基灭菌不彻底Р 4、中后期染菌Р 补料的料液灭菌不彻底或补料管道、阀门渗漏,一般不会是种子问题Р 有时发酵罐偶而染菌,原因一时又找不出,一般可以采取以下措施:Р (1)连续灭菌系统前的料液贮罐在每年4一10月份(杂菌较旺盛生长的时间)加入0.2%甲醛,加热至80°C,存放处理4小时,以减少带入培养液中的杂菌数。Р (2)对染菌的罐,在培养液灭菌前先加甲醛进行空消处理。甲醛用量每立方米罐的体积0.12~0.17升。Р (3)对染菌的种子罐可在罐内放水后进行灭菌,灭菌后水量占罐体的三分之二以上。这是因为细菌芽孢较耐干热而不耐湿热的缘故。Р 五、染菌的防止Р 1、防止种子带菌Р ●制备种子时对沙土管及摇瓶严格加以控制。Р ●沙土制备时要多次间歇灭菌Р ●注意接种时的无菌操作Р ●子瓶、母瓶的移种和培养Р ●无菌室和摇床间都要保持清洁。无菌室内要供给恒温恒湿的无菌空气,还要装紫外Р 灯用以灭菌,或用化学药品灭菌。Р 无菌室要求Р 无菌室装有紫外灯,打开紫外灯,照半小时,关灯后15分钟再接种。
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