法Р原理Р在储粮过程中真菌生长,将会伴有大量的真菌孢子产生,通过检测粮堆中储藏真菌孢子数的变化,可对储粮真菌生长(危害)情况进行判定。Р试剂和仪器Р试剂:去离子水。Р无菌试管:50.0mL,无刻度。Р无菌短颈玻璃漏斗Р无菌量筒:50.0mL,最小刻度为5mL。Р无菌滤布:空隙为300目。Р无菌胶头滴管:20cmР无菌血球计数板.Р盖玻片Р天平:感量为0.01g。Р计时器:最小计时单位为0.01s。Р计数器Р显微镜:10x~100xР分析步骤Р试样制备Р取混合均匀样品,称取10g,精确到0.01g,于50mL试管中,并用量筒加入30.0mL去离子水,震荡1min震荡频率为130~140次/min。震荡后立即过滤,在玻璃漏斗中放入滤布过滤。Р点样Р取盖玻片置于血球计数板计数区上,震荡20次,迅速将胶头滴管插入试管底部,吹吸三次,去第四次样液沿盖玻片与血球计数板连接处滴入一滴。Р计数Р点样后,将计数板静置10s,置于显微镜置物台,观察孢子不移动即可开始计数。计数方法参照血球计数板计数法。Р血球计数板Р血球计数板计数区Р注:红色区域为血球计数板的计数区Р结果计算和表示Р计算公式Р 每毫升清洗液中真菌孢子数计算公式(A.1):Р (A.1)Р式中:x1——25个中方格规格计数板内的真菌孢子总数,单位为个每毫升(个/mL);Р A——计数室中25个中方格内真菌孢子总数,单位为个(个)。Р 样品中真菌孢子数计算公式(A.2):Р (A.2)Р式中:x1——25个中方格规格计数板内的真菌孢子总数,单位为个每毫升(个/mL);Рx2——每克粮食样品中真菌孢子总数,单位为个每克(个/g);Р Р结果表示Р 检测结果以两次计数的算术平均值表示。计算结果表示到小数点后1位。判别规则如表A.1。Р判别规则Р级别Р危害真菌孢子数(个/g)Р安全性评价Р主要危害真菌РⅠР未检出Р安全Р未出现危害真菌生长
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