提高5 倍以上的β- 葡萄糖苷酸酶( GUS ) 突变基因;耐 85℃高温的β- 葡萄糖苷酸酶突变基因;比活提高 10 倍左右的 XylE 基因; 超级阻遏的 CI和 LacI 阻遏蛋白突变基因( 可用于构建无泄漏的原核高效表达系统); 比活提高 60 倍以上的大肠杆菌 lacZ 基因;不依赖于乙酰丁香酮-- -- 诱导的根癌农杆菌 VirG 突变基因;比活提高 30 倍以上, 且耐 90℃高温的新型 3- 植酸酶基因等。同时在酸性、耐高温植酸酶的产业化方面取得了突出成绩。该项目的主要研究内容包括:植酸酶基因的 DNA shuffling 突变及体外定向分子进化;突变植酸酶基因高效分泌表达系统研究;植酸酶工程菌株的发酵优化;发酵后的膜分离技术研究;植酸酶的超滤浓缩技术研究;植酸酶的制剂技术研究;基因工程植酸酶的动物饲养试验、毒性试验及我国农业部转基因生物安全性评价。与目前国内外同类研究或技术成果综合比较,本项目在植酸酶基因定向分子进化和发酵工程技术方面都处于国际领先水平。该项目研发的耐高温植酸酶开拓了植酸酶应用的新领域,首次使植酸酶可以用作市场十分广阔的颗粒饲料添加剂, 植酸酶用于颗粒饲料添加剂每年全球的市场潜力在 27亿人民币左右。该项目发表了 4篇 SCI 论文, 申报了四项基因发明专利及一项发酵工程有关的发明专利,通过评审被认定为** 市高新技术项目。最近两年中还和华东理工大学合作开展了不同枯草杆菌菌株核苷合成中关键酶基因核苷酸序列比较、 pur 操纵子和阻遏蛋白相互作用及代谢工程研究,并取得了显著成绩。研究得出肌、鸟苷生产菌株高产核苷可能机理包括: 腺苷合成关键酶 purA 基因的移码突变造成了腺苷合成的缺陷;肌、鸟苷生产菌株 pur 操纵子控制的 12 个编码酶的基因发生了突变, 从而造成其中 4 个酶的氨基酸序列发生了改变,可能提高了酶的活性或部分解除了产物对酶
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