大豆制品中尿素酶活性的两种快速检测法

为±0.02 pH单位或更佳。仪器操作及pH值测定均应依照制造商的说明，该pH计应在测定前以标准缓冲液加以校正。РР1.2试管 20 mm×150 mm并配有橡皮塞。Р2. 试剂Р2.1 取0.05 mol/L磷酸盐缓冲液溶解3.403 g磷酸二氢钾（KH2PO4）于约100 mL新蒸馏水中，溶解4.335 g磷酸氢二钾（K2HPO4）于约100 mL的蒸馏水中，然后将此两种溶液合并配成1000 mL。其pH值应为7.0，否则应在使用前用强酸碱调整为7.0。依上述方法制备的缓冲液，其有效期在90 d内。Р2.2 已加缓冲液的尿素溶液 溶解15 g尿素于500 mL磷酸缓冲液中，加5 mL甲苯作为防腐剂以防止细菌生成，依前述方法调整尿素溶液的pH值为7.0。Р2.3 样品的制备 尽可能研磨样品为细粉，至少有60%通过试验筛孔径为0.4 mm，但勿使温度升高。Р3. 测定步骤Р3.1 正确称取0.2 g（准确至0.002 g）样品于试管中，加入10 mL已加缓冲液的尿素溶液，加塞混合，然后置于30℃水浴中。在混合操作时试管切勿倒置。РР3.2空白试验需正确称取0.2 g（准确至0.002 g）样品于试管中，并加入10 mL磷酸盐缓冲液，加塞混合，放置30℃水浴中而制成。上项试验的制备与空白试验的制备须相隔5 min，然后每隔5 min搅拌试管内容物1次。Р3.3静置30 min后，相隔5 min将试验及空白试验的试管自水浴中取出，将上层的液体移入5 mL烧杯中，在自水浴中取出刚达5 min时，分别测定此种上层液体的pH值。Р4 计算Р试验试管的pH值与空白试管的pH值两者之差异，即为尿素酶活性的指数。Р本项操作必须小心，以防止各玻璃仪器或电极被沾污，若pH计不能立即表示稳定的pH值时，应加以检查。有时由于大豆可溶成分的附着，会使电解质经过甘汞电极的多孔纤维的流动速度而降低。