ia,Stockholm,SwedenLactobacilluscaseiCRL431Chr.Hansen,Milwaukee,Wis.LactobacillusrhamnosusGR-1Urex,London,CanadaLactobacillusfermentumRC-14Urex,London,uslactissubsp.ussalivariussubsp.thermophilus纷繁众多的益生菌菌种、菌株水平上的生物多样性和功能多样性?益生菌及产品开发的一般流程vitromodel16SrDNAIdentificationfunctionalprobioticspre-rationactivitymaintaintechnologyhighactivityprobioticsstartersourcestrainevaluationanimalmodelcellmodelCaco-2用表型及基因分型方法进行株的鉴别,属、种、株功能学特征体外实验动物实验安全性评价体外实验/动物实验第一阶段人体实验双盲、随机、安慰剂对照(DBPC)第二阶段人体试验或按样品量设计的其他试验,根据结果判定菌株/产品是否有效最好有第二个DBPC方法确证结果第三阶段,有效性试验,将益生菌与特定条件下的标准处理方法进行比较标识:属、种、株名称,保质期末最小的活菌数、保存条件、供消费者联系方式益生菌食品FAO/WHO关于益生菌评价的指导方针FAO/WHO推荐的菌株鉴定方法结合表型、遗传学方法糖发酵及产物分析DNA杂交16SrRNA序列分析脉冲场分析(PFGE)——GoldenStandardDNA随机扩增多态性分析(RAPD)质粒分型FAO/WHO推荐的益生菌筛选的体外实验对胃酸、胆酸耐受性分析胆盐水解酶活性分析粘膜/人上皮细胞粘附性分析对致病菌的抗菌活性分析降低致病菌粘附能力分析抗生素药性谱测定