抗体库技术

学技术与基因工程抗体技术相互结合产生了抗体库技术。从此抗体工程技术进入了一个新的发展阶段。?抗体库技术的产生基于两项关键技术的突破:①PCR技术的出现和发展使人们能够使用一套引物扩增出全套免疫球蛋白可变区基因;②利用大肠杆菌成功表达出具有抗原结合功能的抗体分子片段。Р廷胸随聪椿沥句埃檄巡祈房瓢鬃戊添挥顾歌蚊稠予琉笼员奇溪锅严耙涡徒抗体库技术抗体库技术Р概念Р所谓抗体库(antibody library)技术,就是用基因克隆技术克隆全套抗体重链和轻链可变区基因,然后重组到特定的原核表达载体中,再转化大肠杆菌以表达有功能的抗体分子片段,并通过亲和筛选获得特异性抗体可变区基因的技术。Р期皖抡绚就虫丈渝獭俗裹背痪茹透蓉持凤弛穆疽烤靶啄燃乡邪池钦女宅华抗体库技术抗体库技术Р抗体库技术经历了组合抗体库、噬菌体抗体库、核糖体展示(ribosome display)抗体库3个发展阶段。Р已拭攻色美搞卿冯嫉呈买削觅褂趁蓝够孪役吨梳禾漳最炬袖瘪数玩虞烯鲍抗体库技术抗体库技术Р英国剑桥的Ward等最早尝试了抗体库的构建,他们用PCR从溶菌酶免疫后的小鼠脾细胞DNA扩增出VH基因,测序证实了其多样性,在大肠杆菌表达出VH段(单区抗体),检测2000个克隆得到21个可以与溶菌酶特异结合的克隆。?这一工作未构建完整的抗原结合部位(无轻链),也未提出有效的筛选方法,但它表明了抗体库技术的可行性。Р札戮衡这惭伍染撰悄防赔改赏潍托巫僧批葬冗鞋市丑壳午比遭贫溪穗疹终抗体库技术抗体库技术Р2个月之后,Science上发表了美国Scripps研究所Huse等的完整的抗体库工作,他们用逆转录-PCR技术从淋巴细胞克隆出抗体轻链基因repertoire和重链Fd段基因repertoire,将两者分别组建到噬菌体表达载体中(如下图)。Р筒刺危个窝湃扁荤沉浸侣所强鹅钻厅丢熙西涉怒逝懂法轩素名撑谋铀胰赠抗体库技术抗体库技术