生物素-亲和素免疫放大技术Р湘雅医学院医学检验系РBiotin-Avidin Immune Amplification TechniqueР掌握生物素-亲和素系统的特点Р﹡目的与要求:Р熟悉生物素的理化性质与活化Р了解生物素-亲和素系统的应用Р概述: 生物素、亲和素的发现РBiotin and AvidinР20世纪60年代初发现了生物素(biotin)和卵白素(avidin)Р生物素(biotin,B)广泛分布于动、植物组织中,常从含量较高的卵黄和肝组织中提取Р亲和素(avidin,AV)亦称抗生物素蛋白、卵白素,是从卵白蛋白中提取的一种由4个相同亚基组成的碱性糖蛋白Р生物素РⅠ环为咪唑酮环,是与亲和素?结合的主要郎部位РII环为噻吩环Р有一戊酸侧链,其末端羧基是结合抗体和其他生物大分子的惟一结构Р亦称抗生物素蛋白、卵白素,是从卵蛋白中提取的一种由4个相同亚基组成的碱性糖蛋白,每个亲和素能结合4个分子的生物素Р亲和素:Р生物素的及活化Р标记蛋白质氨基的活化生物素?标记蛋白质醛基的活化生物素?标记蛋白质巯基的活化生物素?标记核酸的活化生物素РBNHS(biotinyl-N-hydroxy-inimide ester):生物素-N-羟基丁二酰亚胺酯Р BCNHS(N-hydroxy-inimido-6-biotinyl amido hexanoate):? 长臂活化生物素Р标记蛋白质氨基的活化生物素:Р生物素N-羟基丁二酰亚胺酯(BNHS)РBNHS的制备方法:Р*生物素+N-羟基丁二酰亚胺Р↓
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