HGP)于1990年正式启动,其主要目标有:识别人类DNA中所有基因(超过10万个);测定组成人类DNA的30亿碱基对的序列;将这些信息储存到数据库中;开发出有关数据分析工具;致力于解决该计划可能引发的伦理、法律和社会问题。已于2003年完成。? 人类基因组计划是当代生命科学一项伟大的科学工程,它奠定了21世纪生命科学发展和现代医药生物技术产业化的基础,具有科学上的巨大意义和商业上的巨大价值。Р造福人类的HGPР1949年, Frederick Sanger开发了测定胰岛素两条肽链氨基末端序列的技术,1953年测定了胰岛素的氨基酸序列。Р1950年,Edman提出了蛋白质的N端测序技术,后来在此基础上发展出了蛋白质自动测序技术。Р1965年,Sanger等发明了RNA的小片段序列测定法,并完成了大肠杆菌5S rRNA的120个核苷酸的测定。Р同一时期,Holley完成了酵母丙氨酸转运tRNA的序列测定。Р蛋白质和RNA的测序技术Р二、测序技术的建立Р1975年,Sanger和Coulson发明了“加减法”测定DNA序列。Р1977年, Sanger在引入双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)后,形成了双脱氧链终止法,使得DNA序列测定的效率和准确性大大提高。Р1977年,Maxam和Gilbert报道了化学降解法测定DNA的序列。РDNA测序技术的建立Р1、第一代DNA测序技术Р第一代DNA测序技术:? 传统的化学降解法、双脱氧链终止法以及在它们的基础上发展来的各种DNA测序技术。Р第一代DNA测序技术包括:化学降解法、双脱氧链终止法、荧光自动测序技术和杂交测序技术。Р1.1 化学降解法Р基本原理:? 利用特异的选择性试剂,专一性的随机断裂DNA成不同长短的片段。根据试剂的选择性及片段在高分辨力的聚丙烯酰胺凝胶电泳上的区带位置,判断DNA片段末端核苷酸的种类,从而测出DNA的序列。
全文预览
