Cl、FeSO4·7H2O、琼脂、10%NaOH溶液、10%盐酸。?(2)器材:小烧杯、小铝锅、天平、牛角匙、1000mL刻度烧杯、玻棒、pH试纸、试管、分装漏斗、棉花。Р三、方法与步骤?1、牛肉膏蛋白胨培养基的配制? (1)培养基配方: 牛肉膏5.0g 蛋白胨10.0g、NaCl5.0g、琼脂20.0g、自来水1000mL、pH7.0。? (2)操作步骤:? 1)称药品按实际用量计算后,按配方称取各种药品放入大烧杯中。牛肉膏可放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶解后倒入大烧杯;也可放在称量纸上称量,随后放人热水中,牛肉膏便与称量纸分离,立即取出纸片。蛋白胨极易吸潮,故称量时要迅速。Р4)过滤液体培养基可用滤纸过滤,固体培养基可用4层纱布趁热过滤,以利结果的观察。但是供一般使用的培养基,该步可省略。?5)分装披实验要求,可将配制的培养基分装入试管或三角瓶内。分装时可用漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上面造成污染(见图4-1)。?分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面(图4-2)。分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜。半固体培养基以试管高度的1/3为宜.灭菌后垂直待凝。Р6)加棉塞试管口和三角瓶口塞上用普通棉花(非脱脂棉)制作的棉塞,棉塞制作方法如图4—3。棉塞的形状、大小和松紧度要合适,四周紧贴管壁,不留缝隙,才能起到防止杂菌侵入和有利通气的作用。要使棉塞总长约3/5塞入试管口或瓶口内,以防棉塞脱落。有些微生物需要更好的通气,则可用8层纱布制成通气塞。有时也可用试管帽或塑料塞代替棉塞。Р7)包扎加塞后,将三角瓶的棉塞外包一层牛皮纸,以防灭菌时冷凝水沾湿棉塞。?8)培养基的灭菌时间和温度,需按照各种培养基的规定进行,以保证灭菌效果和不损培养基的必要成份。培养基经灭菌后,必须放37℃温室培养24h,无菌生长者方可使用。Р图例Р图4-1 培养基分装图4-2 斜面制作
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