扩增的反应过程,是DNA的体外扩增技术,本质是DNA的体外复制。Р4Р1971年Khorana最早提出核酸体外扩增的设想? 他认为“经过DNA变性,与合适的引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断的重复该过程便可合成tRNA基因”? 1983年美国Kary Mullis 等发明了具有划时代意义的聚合酶链反应? 1988年Saiki 等利用一种耐热DNA聚合酶,实现了PCR技术的自动化?各种PCR技术的发展РPCR技术发展简史Р5РKary B. Mullis (1944 -),在Cetus公司工作期间,发明了PCR。他原本是要合成DNA引物来进行测序工作, 却常为没有足够多的模板DNA而烦恼。Р1983年春夏之交的一个晚上,他开车去乡下别墅的路上萌发了用两个引物(而不是一个引物)去扩增模板DNA 的想法…...Р6РMullis开车的时候, 瞬间感觉两排路灯就是DNA的两条链,自己的车和对面开来的车象是DNA聚合酶,面对面地合成着DNA, ……Р7Р1983年9月中旬,Mullis在反应体系中加入DNA聚合酶后在37℃一直保温。结果第二天在琼脂糖电泳上没有看到任何条带。于是他认识到有必要用加热来解链,每次解链后再加入DNA聚合酶进行反应,依次循环。Р 1983年12月,他终于看到了被同位素标记的PCR条带РMullis的第一个PCR实验Р8РKary B. MullisР<<The Unusual Origin ?of the Polymerase Chain Reaction>>Р1989年美国《Science》杂志列PCR 为十余项重大科学发明之首,比喻1989年为PCR爆炸年,Mullis荣获1993年度诺贝尔化学奖。Р9РDNA的复制(replication)? ——由亲代DNA合成两个相同的子代 DNA的过程。Р复制Р亲代DNAР子代DNAРPCR的基本原理Р10
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