NA 专用器材和试剂的处理: Р(1)玻璃器皿、研钵:200℃高温烘烤 4 小时以上。Р(2)塑料制品:0.1%DEPC 水,溶液侵泡过夜,然后高压蒸汽灭菌 30min Р1.3 肾肿瘤患者组织标本收集Р 在研究期间,我们共收集了 2012 年 9 月至 2013 年 6 月武汉协和医院 78 例不同Р类型肾肿瘤患者的癌组织和相应的癌旁组织标本,其中包括肾透明细胞癌 68 例,肾Р错构瘤 7 例,嫌色细胞癌 2 例,肉瘤样癌 1 例。所有患者的病理类型均由华中科技大Р学同济医学院附属协和医院病理科医生确诊。所有的标本组织都是患者签署知情同意Р书和得到华中科技大学同济医学院伦理委员会批准后收集。每位患者在手术前均未接Р受放疗、化疗及药物治疗等抗肿瘤治疗。取材方法:在肾肿瘤标本离体 15min 内,用Р手术刀切取长约 1cm、厚约 0.5cm 的肿瘤组织标本 3 块,另外在肿瘤组织远端 2cm 外Р处切取正常组织 3 块。所有切取的离体组织标本均以预冷 PBS 洗去污物和血迹,装入Р标本管中保存,立即放人液氮中迅速冷冻,然后保存在-80℃冰箱中。Р1.4 芯片分析和检测类型Р RCC 患者组织标本送到上海伯豪生物技术有限公司提取РRNA,并做微小 RNA microarray 芯片检测和分析。芯片类型为 G4471A Human Рmicroarray(Agilent Technologies),包含 851 个人的 miRNAs(Sanger miRBase release Р12.0)扫描器为 laser confocal scanner(G2565BA,Agilent Technologies),图像处Р理软件为 Agilent Feature extraction software 9.5.3。Р1.5.qRT-PCR 检测肾肿瘤患者组织中 miR-141 的表达Р 9
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