秀丽线虫综述

5.12gNa2HPO4#12H2O( 或 6gNa2HPO4),3gKH2PO4,5gNaCl,0.25gMgSO4#7H2O, 宜现用现配 S缓冲液—— 0.1mol/LNaCl,0.05mmol/L K2HPO4-KH2PO4 缓冲液(pH=6.0) 喂养方法?用冰 M9 缓冲液清洗虫体?置4℃环境 20min ? 1000r 离心,弃上清,沉淀物用 M9 缓冲液重悬?置4℃环境 20min 弃上清?取 200ul 沉淀物以靠接法接种到涂有大肠杆菌 OP50 的 NGM 培养基上?将培养基放置到 16 ℃生化培养箱中, 72h 后可繁育至第二代?冻存准备 1mlEP 管,加入 700ul30% 甘油( s缓冲液溶解) 用冰 M9 缓冲液清洗虫体置4℃环境 20min , 1000r 离心弃去上清将虫体转入事先准备好的 EP 管中,置于-80 ℃冰箱冻存(可保存 2个月),需要时取出室温解冻重置培养基研究范围?细胞程序性死亡的遗传调控机制? RNAi 及其作用机制?秀丽线虫的功能基因组学及其他研究?低氧应答模式生物?基因组学和功能蛋白组学的研究?其他( MAPK 信号传导、 TGF- b 信号传递途径、衰老和年龄及脂肪代谢等) 方法——线虫基因显微注射显微注射技术是线虫研究领域的常用技术,对线虫进行转基因操作的一种高效且相对简单的方法,主要用于研究线虫突变种系的功能恢复(mutant rescue) 、特定基因的过表达或异位表达、标签蛋白的表达、特定蛋白质结构域的功能、 DNA 或 RNA 调节元件的分析及 RNA 干扰等. 此外,这项转基因技术对于特异表型的筛选也是个强有力的工具,并且它还可用于将人工合成 mRNAs 或其他分子接引入细胞设备?显微注射全套仪器?琼脂糖固定垫?添加了 4% 葡萄糖 (glucose) 的 M9 缓冲液