第六章免疫比浊分析?免疫比浊分析是将液相内的沉淀反应与现代光学仪器和自动分析技术相结合的一项分析技术。第二节自动化免疫比浊分析第一节免疫比浊的原理一、透射免疫比浊法二、散射免疫比浊法三、免疫胶乳比浊法四、免疫比浊分析的影响因素和临床应用第一节免疫浊度分析原理抗原、抗体在特定的电解质溶液中反应,形成小分子免疫复合物(<19S),在增浊剂(如PEG、NaF等)的作用下,迅速形成免疫复合物微粒(>19S),使反应液出现浊度。这种浊度可用仪器检测,用吸光度表示。第一节免疫浊度分析原理在抗体稍微过量且固定的情况下,形成的免疫复合物量随抗原量的增加而增加,反应液的浊度亦随之增大,即待测抗原量与反应溶液的浊度呈正相关。免疫比浊技术分类:透射免疫比浊法(turbidimetric immunoassay)散射免疫比浊法(nephelometry immunoassay)速率散射比浊法终点散射比浊法一定波长的入射光线通过抗原抗体反应后的溶液时,由于溶液中的免疫复合物微粒对光线的吸收、反射和折射而使透射光减少,可用吸光度表示。在一定范围内,吸光度与免疫复合物量呈正相关,而形成的免疫复合物量与参与反应的抗原和抗体的量呈函数关系。一、免疫透射比浊法(一)原理:抗原抗体反应曲线 1.将待检标本和抗原参考品作适当稀释。(二)操作方法 2.将待测标本和标准抗原溶液(5个浓度抗原标准品)与适当过量的抗血清混合,在一定条件下,抗原抗体反应完成后,在340nm处测定各管吸光度。3.按log-logit转换或y=ax3+bx2+cx+d方程进行曲线拟合,制备剂量-反应曲线,由计算机处理,计算出抗原浓度。
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