和 GSK-3β组成的复合物,从而增加细胞内β-cateninР的含量,使其进入细胞核,激活 Wnt 目标基因的转录,诱导未成熟Р大脑和成熟大脑中神经元的新生[21]。在大脑皮质,海马的发育以及成Р年后齿状回区的维持需要 Wnt/β-catenin 信号传导[22,23]。基因的突变一Р旦影响 Wnt 信号的传导会导致大部分皮质中间区域(例如海马)发Р育的缺陷。胚胎发育时期,抑制β-catenin 引起前体细胞提前离开细胞Р周期而进行分化[24]。而此信号的传导可以促进神经前体细胞的增殖。Р在体外研究中发现,无论是发育中或者成熟小鼠皮质室下区的神经前Р体细胞和多能干细胞的增殖都受其影响,在神经发育中晚期,WntР通路对于放射状胶质细胞主要促进细胞的增殖[27]。此项研究结果还证Р实 Wnt/β-catenin 传导通路有一个关键性的下游基因是 Pax6[27]。因此Р我们有理由提出假设认为:七氟醚是通过 Wnt/β-catenin 信号通路作Р用于 Pax6,影响其下游细胞周期相关基因 nd1 的表达,从而Р抑制胎鼠神经前体细胞增殖。Р 为研究本课题提出的假说,我们将采取多种技术进行体内以及体NSFC 2014Р外研究。我们将采取免疫组化以及分子生物学的方法,研究在孕中期Р七氟醚是否通过 Wnt/β-catenin 通路抑制胎鼠大脑中 Pax6 表达及其下Р游细胞周期相关基因 nd1 的表达,造成神经前体细胞池的减Р少,最终引起胎鼠成年后学习以及记忆能力的损伤。通过体外运用РTet-on 系统,人为上调 Pax6 的表达水平,验证 Pax6 可以挽救七氟醚Р对 cdk6 dn1 表达的抑制,证实 Pax6 在其中的关键作用;使用 LiР剂抑制 GSK-3β,来验证七氟醚通过 Wnt/β-catenin 通路抑制神经前体Р 第 9 页版本:14000000110000017
全文预览
