效应器区域 DNA 结合蛋白Р(DEDD)的作用机制研究中则发现,NSFCDEDD 2014通过与 PI3KC3/Beclin-1 相互作用Р激活自噬,进而促进 EMT 重要调节因子 Snail 和 Twist 的降解,抑制 EMT 过程。Р 因此我们推测,自噬可能通过调节肺泡 II 型上皮细胞的 EMT 过程,对损Р伤与修复异常、纤维化的发生发展产生重要影响。Р 基于上述理论和研究基础,我们推测自噬影响肺泡 II 型上皮细胞发生 EMTР的机制如下图(图 2)。Р 第 8 页版本:14000000110000022Р国家自然科学基金申请书 2014版Р Р 图 2 自噬调节 EMT 的可能机制Р Р4)RNA 干扰技术阻断靶基因表达可为 IPF 发病机制研究与治疗提供新手段。Р RNA 干扰技术通过体外合成短双链小干扰 RNA(siRNA)转入细胞,可高Р效、特异地抑制细胞内特定基因的表达。目前技术相当成熟,已被用于病毒性Р疾病、遗传性、肿瘤性疾病的治疗研究。NSFC 2014Р 目前针对调节自噬的药物与试剂主要有:雷帕霉素、氯喹、3-甲基腺嘌呤Р(3-MA)等。这些化学调节剂的应用仍存在特异性低、副作用大等不足。如我Р们前期研究发现,雷帕霉素减轻纤维化的同时,实验动物体重下降明显,不利Р于临床治疗应用;同时雷帕霉素影响信号通路众多,不利于发病机制的研究。[29]Р因此,通过基因技术如 RNA 干扰或将成为更有效的研究工具,也为今后 IPF 治Р疗药物的开发提供了新手段。Р Р 借鉴以上研究理论及基础,本项目拟通过构建 BLM 诱导的肺间质纤维化模Р型,观察不同阶段肺泡 II 型上皮细胞自噬与 EMT 变化过程,分析两者的相关性;Р体外建立 TGF-β1 刺激诱导肺泡 II 型上皮细胞 EMT 模型,通过自噬增强剂、抑Р 第 9 页版本:14000000110000022
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