、口罩等相应的安全防护设施。Р 8.4 检测结束后,实验用品和废弃物,应进行高温高压或其他生物安全处理。Р Р Р Р Р Р Р Р 2Р学兔兔Р DB12/T 521—2014 Р Р Р 附录 A Р (规范性附录) Р 培养基和试剂配制方法Р Р A.1 Middlebrook7H9 基础培养基Р 将Middlebrook7H9基础培养基(自购)4.7 g加入900 mL蒸馏水(或去离子水)中,充分混匀,溶Р 解,121℃灭菌10 min,冷却至室温后使用。置于25℃下贮存,有效期4周。如该溶液污染(浑浊),则Р 弃用。Р A.2 完全培养基Р 无菌条件下,将小牛血清复合物20 mL加至无菌已冷却的180 mL7H9基础培养基中,制得完全培养基。Р 4℃保存备用,有效期4周。如该溶液污染(浑浊),则弃用。Р A.3 3% NaoH溶液Р 取NaoH 30 g,溶于1000 mL蒸馏水中,121℃灭菌10 min,冷却后备用。Р A.4 噬菌体D29溶液Р 自购,用无菌完全培养基将噬菌体D29调至工作浓度为1.0×108Pfu/mL,4℃保存备用。Р A.5 指示细胞溶液Р 耻垢分枝杆菌(, 607, 自购),用无菌完全培养基将指示细胞配制成浓度为1.0×106 cfu /mL,Р 4℃保存备用。Р A.6 杀病毒剂Р 将50 mL浓硫酸加入到800 mL蒸馏水中,冷却后再溶入40 g硫酸亚铁铵。在容量瓶中稀释到1000 mL,Р 4℃保存备用。贮存过程中,该溶液可能褪色或产生沉淀,但不影响其使用。Р A.7 琼脂培养基Р 将 1.5 g琼脂培养基干粉加入 100 mL7H9基础培养基中,充分混匀,加热溶解,121℃灭菌 10 minР 冷却至 55℃左右时使用。置于 25℃条件下贮存,有效期 4 周。再次使用则需加热融化,重融次数不Р 得超过 3 次。Р Р Р 3
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