.......................51攻读学位期间的研究成果.........................................................................................71万方数据第一章引言1第一章引言1.1酪氨酸酶的结构与功能1.1.1酪氨酸酶的立体结构酪氨酸酶(EC1.14.18.1,Tyrosinase),亦称多酚氧化酶、儿茶酚氧化酶,是一种双核铜离子氧化还原酶[1]。1895年,埃尔利希就已发现酪氨酸酶广泛存在于人体、动植物以及微生物中[2-5]。酪氨酸酶是生物体内合成黑色素的关键酶[6],不同生物体内氨基酸残基的数目相差较大,分子量一般为60-70 kDa[7]。经过一个多世纪的探索后,对酪氨酸酶的立体结构[8,9]、生理功能[10,11]以及催化机理[12]等方面的相关研究也已经取得了突飞猛进的进展。根据酪氨酸酶活性中心特异性结合位点的两个金属离子的光谱学特性[13],酪氨酸酶活与儿茶酚氧化酶都属于type-3铜蛋白家族,即活性位点处的两个铜离子分别与三个组氨酸残基相结合[14,15],形成四面体结构在结构,如图1.1所示。图1.1酪氨酸酶活性中心Fig. 1.1 The active site of tyrosinase酪氨酸酶是一种具有高疏水性的膜结合蛋白,通过获得高衍射质量的晶体来解析其晶体结构是极其困难的。1988年获得儿茶酚氧化酶的晶体立体结构,此后便以儿茶酚氧化酶的晶体结构为模型来研究和探讨酪氨酸酶的结构与功能[16]。虽然酪氨酸酶与儿茶酚氧化酶的一级结构同源性较高,而且活性中心高度保守,但儿茶酚氧化酶没有单酚酶活性,只有二酚酶活性[17]。因此,通过以儿茶酚氧化酶为立体结构模型研究酪氨酸酶应该具有很大的局限性。儿茶酚氧化酶与酪氨酸酶的活性中心如图1.2所示。万方数据
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