主活动次数增长百分率=(第10日自主活动次数一第1日自主活动次数)/第1曰自主活动次数×100%、站立次数增长百分率=(第10日站立次数一第1日站立次数)/第1日站立次数×100%。 2)外周血象各组小鼠均剪尾取血2吮l/只(肝素抗凝),自动血球计数仪检测红细胞、白细胞、血红蛋白、血小板。 3)外周血T、B淋巴细胞数各组小鼠均剪尾取血适量,推成均匀的血涂片,迅速用冷风吹干。将片子浸入已预热30min的孵育液中37℃孵育3小时,并用自来水冲洗3—5mjn,滤纸吸干水珠.将片子置入1/15moI,LpH7.6的PBS缓冲液89ml中,缓慢滴入六偶氮副品红液6ml,充分混匀后再慢滴2%a一醋酸奈脂2.5ml,边滴边摇,用冰醋酸调pH6.4。再加入l%孔雀绿溶液复染5—10秒,自来水冲洗,滤纸轻拂,电吹风吹干,显微镜油镜下(10×10)计数200个淋巴细胞,求酯酶染色阴性淋巴细胞(B淋巴细胞)的百分率和阳性淋巴细胞(T淋巴细胞)的百分率。B淋巴细胞百分率=B淋巴细胞个数/200×100%、T淋巴细胞百分率=T淋巴细胞个数/200×100%. 4)骨髓有核细胞数将小鼠颈椎脱臼处死,剪开左后肢股骨附近的皮肤,分离股骨肌,从股骨头大转子和髌骨处截断取得完整股骨,用纱布包缠,除去附着的肌肉。用注射器吸取PBS缓冲液(O.1mol,L、pH=7.4)lml反复冲洗骨髓腔,冲出骨髓细胞,用7 号针头反复吹打,过4号针头制成单细胞悬液,将其置于血细胞计数板,显微镜下(10×40)进行有核细胞计数(4大方格细胞数×2.5×104)。 2.4.2第二批小鼠 1)巨噬细胞吞噬功能各组小鼠于第10日给药后2小时,腹腔注入5%新鲜鸡红细胞生理盐水悬液(O.5ml/只)。4小时后颈椎脱臼处死小鼠,消毒腹部,剪开皮肤,露出腹膜,注入汉氏液2.5ml,轻揉腹部,以求获得较多的巨噬细胞,用镊子提起腹膜,剪一小孔,
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