示,在乳糖营养液中,所筛选的菌株均能较好的生长,因此,所选的营养液足够提供所筛选菌株转化所需营养。见图1.1~1.10(见附录)。4、转化产物TLC鉴别将已转化完成的转化液连同菌种全部倒入蒸发皿中,在水浴锅上蒸干,干燥物转移至250ml三角烧瓶中,用lOOml甲醇超声提取30min,取出过滤,滤液加甲醇至lOOml。用硅胶G板点样,乙酸乙酯:甲酸:水(6:0.5:0.25)展开,1%--氯化铝乙醇溶液为显色剂,在365nm紫外灯下观察。TLC鉴别图谱显示:在删及半乳糖培养基中,各菌种在灯盏乙素对照品斑点相应处均还有相同斑点,而乳糖培养基中,曲霉属果胶酶菌株(GJll79)在灯盏乙素对照品斑点相应处无相同斑点,其余菌种在灯盏乙素对照品斑点相应处均有相同斑点,说明GJl979菌株已转化了灯盏乙素成分。详见图1.11~1.13(见附录)。TLC鉴别点样顺序l、灯盏乙素对照品2、灯盏花素3、灯盏仡素培养4、红曲霉+盏花素培养5、枯草杆菌+灯盏花素培养6、黑曲霉+灯盏花素培养7、糖化霉十灯盏花素培养8、毛霉+灯盏花素培养9、米根霉+灯盏花素培养10、3324+灯盏花素培养11、2006+灯盏花素培养12、GJl979+灯盏花素培养5、转化产物的HPLC鉴别第一章用于发酵的微生物菌株的筛选转化产物中灯盏花素HPLC鉴别参照中国药典2005版一部项下灯盏细辛含量测定方法,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇一0.1%磷酸溶液(40:60)为流动相;检测波长为335nm。HPLC图谱(1.14~1.25)中显示:在与灯盏花素保留时间相同位置上,GJl979转化液无吸收峰,而其余菌种转化液有吸收峰,但峰面积均有不同程度的减少,表明在乳糖营养液中,GJl979菌株能完全转化灯盏乙素。图1.14灯盏乙素对照品的HPLC图谱图1.15灯盏花素的HPLC图谱图1.16未加菌灯盏花素的HPLC图谱9
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