ml保护剂,充分混匀。保护剂的最终浓度分别为10%或5%;⑤分装菌液:将加有保护剂的菌液分装到安咅瓦管中,每管0.5ml。密封;⑥冻结:适于慢冻结的菌种,先放入・45°C低温冰箱lh,再放入液氮罐中保存。适于快速冻结的菌种,可将菌种直接放液氮罐进行超低温冻结保存;⑦保存:可放在气相或液相中保存。气相保存,即将菌种管放在液氮灌内液氮面上的气相部分(-150°C)中保存;液相保存,即将安甑管放入桶内,再放入液氮(-196°C)中保存;⑧复苏培养:将安韻管从液氮中取出,立即放入38°C水浴解冻。由于安甑管内样品少,约3min即可融化。如要测定保存后的存活率,可吸0.1ml融化的悬液,作定量稀释后进行平板计数,再与冻结前计数相比较,即可求出存活率[3]。菌种的保管保存菌种,必须制定相应的规章制度,以保证菌种的安全。般细菌大多保存在4°C冰箱中,但霍乱弧菌、绿脓假单胞菌及粪产碱杆菌需在室温保存,而脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌及初次分离的流感嗜血杆菌需保存于37°C孵箱中。保管的菌种应做好鉴定记录,设专人负责,建立菌种登记本。非干燥菌种注意定期传代或必要的重复鉴定,以防菌种变异。3•讨论尽管质控标准菌株比其他一些菌株药敏结果是相对稳定的,但反复多次的传代不可避免地造成菌株的变异。为防止变异,必须将标准菌株冻干保存。每月从冻干株中复苏1次,种入大豆酪蛋白消化肉汤中作为工作株。工作株可保存于4〜8E,并于每周转种1次。通常工作株转种4〜5次后即须弃去。在质控中,如发现工作株结果有疑问,应予以更换。【参考文献】[1]?胡海林,郭维植.细菌实验菌种的保存及管理[J]•福建医药杂志,2000,22(1):113.[2]?陈秀英.菌种保存方法的比较卩]・中国卫生检验杂志,2002,12(2):231.[3]?叶迎春,赵世鸿,凌体淑・3种菌种保存法比较[J].中国误诊学杂志,2004,4(3):386.
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