当贴附于血细胞上的抗体与游离的抗原相遇时,形成抗原抗体凝集网络,绵羊红细胞也随之凝集,出现肉眼可见的红细胞凝集现象。反向间接血凝试验可作为FMD病毒抗原型别鉴定的初步方法,该方法简便、快捷,适合于田间使用。冃前该法仅在前苏联国家和我国使用,西方国家很少应用,也未列入国际推荐方法。5•反转录■聚合酶链反应(RT-PCR)PCR具备实验诊断所要求的最重要的3个要素:①敏感,可将原样品放大上百万倍,使原本少得难以探察到的(Pg级)样本扩增到能在紫外灯下肉眼可见;②特异,核酸片段与引物间的序列互补,使反应呈高度特异;③操作简单快速。RT-PCR检测的目标物是FMD病毒的RNA,通常以病毒材料为被检样品,可对各种动物组织和细胞来源的病毒材料进行检测,扩增到的PCR片段测定核昔酸序列后,可以确定所属的基因型和基因亚型,进而追踪疫源。二'江西省养猪行业协会江西养猪信息网6•间接夹心ELISA国际口蹄疫参考试验室建议,检测口蹄疫病毒血清型应优先采用间接夹心ELISA,OIE和FAO也一致推荐使用该方法定型诊断。抗体检测通过检测动物体液中(主要是血清)特异性抗体,可对FMD病毒感染与免疫状况做出诊断,通常采用病毒中和试验和ELISA方法,这两种方法也是国际贸易中指定方法。FMD病毒抗体检测可用于以下几个目的:①诊断急性感染,用同一试验检测急性期和康复期猪血清样品,血清抗体阴转阳或抗体滴度急剧上升表示发生了感染,但诊断的前提是猪无疫苗接种史;②证实猪未被感染,用于国际贸易;③在流行病学调查中检测感染情况;④支持疫病扑灭计划和后期检测;⑤接种疫苗后效价测定。值得提示的是免疫猪有时抗体滴度很低,甚至检测不到抗体,但攻毒后仍能保护。新诊断技术进展FMD诊断检测技术正在不断地改进和创新,己从血清学诊断技术领域扩展到了分子生物学诊断技术领域。这些新技术的最大优点体现在简便、快速、精确、灵敏以及高通量化。
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