骤及要点?答案:1、菌液制备:新鲜菌落制成1.Omg/ml菌悬液,依次稀释至10-2和10-4mg/mlo2、接种:分别接种10-2和10-4mg/ml菌液0.01ml至对照及含药培养基斜面。3、?培养:37C培养4周4、?结果的判读、解释和报告:计算耐药百分比,即含药培养基上菌落数与无药培养基上菌落数相比的百分比。小于1%报告敏感,大于或等于1%报告耐药。(2)结核菌痰培养基本步骤和要点?答案:1、痰标本去污染处理:视标本性状,加1-2倍体积4%氢氧化钠(NaOH)消化液于痰瓶中,拧紧螺旋盖,涡旋振荡器上振荡1分钟,使痰液充分匀化,室温放置。自加入氢氧化钠消化液起,整个处理时间应在15-20分钟。样本数较多时,应分批处理。2接种和培养:用吸管取去污染后的标本0.1ml,均匀接种在整个培养基斜面,每份标本接种2只酸性罗氏培养基。接种后斜面向上于37€环境中平放24小时后,检查培养基污染情况,拧紧瓶盖,直立放置,37C继续培养。3?结果报告1、接种后第3、7天各观察一次菌落生长情况。发现菌落生长者,经抗酸染色证实后,可报告快速生长分枝杆菌阳性。此后每周观察一次,记录菌落生长及污染情况。阳性生长物经抗酸染色证实后,可报告分枝杆菌生长。培养阴性结果须在满8周后未见菌落生长者方可报告。2、观察时发现非分枝杆菌生长时,应报告污染。培养污染率应在2-5%范内。污染率过高,提示培养基灭菌不佳,标本前处理、接种等环节有误,应当分析原因,采取相应措施。3、培养结果报告方式:/4/2/4分枝杆菌培养阴性:斜面无菌落生长分枝杆菌培养阳性(1+):菌落生长占斜面面积的1分枝杆菌培养阳性(2+):菌落生长占斜面面积的分枝杆菌培养阳性(3+):菌落生长占斜面面积的分枝杆菌培养阳性(4+):菌落生长布满整个斜面分枝杆菌培养阴性应以“培养阴性”报告,不得以表示。菌落生长不足斜面面积1/4者,报实际菌落数。
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