1.取洁净玻板一块,用玻璃铅笔划成方格,并注明待检血清号码。2.取0.2ml吸管分别吸取0.08ml、0.04ml、0.02ml和0.01ml各放入一方格内。大规模检验时,可只做2个血清量,大动物用0.04ml和0.02ml,中小动物用0.08ml和0.04ml。每检一个样品需换一只吸管。3.每格内加布氏杆菌平板凝集抗原0.03ml,滴在血清附近,而不要与血清接触。用牙签(或火柴杆)自血清量最小的一格起,将血清与抗原混匀,每份血清用一根牙签。4.混合完毕,将玻板置凝集反应箱上均匀加温或采用别的办法适当加温,使温度达到30℃左右。3min~5min内记录结果。结果判定++++:出现大的凝集块,液体完全清亮透明,即100%凝集。+++:有明显的凝集片,液体几乎完全透明,即75%凝集。++:有可见的凝集片,液体不甚透明,即50%凝集。+:液体混浊,有小的颗粒状物,即25%的凝集。-:液体均匀混浊,即不凝集。以出现++凝集的血清最高稀释倍数作为该份血清的凝集价。大动物(牛、马、骆驼等)以0.02ml出现凝集价判为布氏杆菌病血清阳性,0.04ml出现凝集价判为可疑。中小动物(猪、山羊、绵羊等)以0.04ml出现凝集价判为该份血清为布氏杆菌病阳性血清,0.08ml出现凝集价判为可疑。注意事项1.每次试验必须以标准阳性血清和标准阴性血清进行对照。2.加抗原前必须摇匀。3.反应温度最好保证在30℃左右,3min~5min内判定。如反应温度偏低,可适当延长判读时间。4.如用两个血清量作试验,任何一个血清量出现凝集反应时,则需要用四个血清量重检。5.平板凝集反应最好是用于初筛,如出现阳性或可疑反应,再用试管凝集反应进行复检,以定性。6.平板凝集反应与试管凝集反应的关系。表平板凝集反应与试管凝集反应的关系平板凝集反应0.080.040.020.01试管凝集反应1︰251︰501︰1001︰200
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