,可加入氯化钡在碱性介质中沉淀除去,然后调节至中性后再进行测定。Р发酵液黏度测定:用黏度计测定。Р发酵中生物量测定:收集菌丝体,用分光光度计测定。Р L-苹果酸测定:用酸碱滴定法测定。Р3.发酵终点Р当L-苹果酸的含量达到108.72g/L时即可放罐。Р四.L-苹果酸提取工艺操作要点Р(1)发酵液过滤浓缩:发酵液经泵加压后进入板框过滤机,L-苹果酸随清液流出,而菌丝体、蛋白质和固体悬浮颗粒等杂质被截留,将他们热交换器冷却后,送回罐进一步浓缩,直至超滤浓缩液呈浆糊状,再用少量的水清洗,使滤液渣中残余的L-苹果酸充分洗涤出来。洗涤出的苹果酸溶液的浓度为12%。Р(2)中和抽滤:将得到的清液转入中和桶,就加入碳酸钙中和,变为苹果酸钙从液相中析出,从而与发酵液中其他可溶性杂质分离。温度在45℃—50℃,pH6.9—7.2。加入碳酸钙时,加入速度以泡沫不溢出桶外为好。放入虹吸排液真空抽滤机抽滤。用40℃热水洗涤。Р(3)酸解脱色过滤:将苹果酸钙加入其重量3—4倍的水,调浆,加热到50℃—55℃,缓慢滴加硫酸至pH为1.5—2.0,继续搅拌10min,加粉末活性炭(10g/L—30g/L)脱色,硫酸一般为碳酸钙的用量的92%—95%,过滤,除硫酸钙,活性炭,用热水洗涤,收集到的滤液中苹果酸的浓度为16%。Р(4)将苹果酸液通过离子交换树脂除去各种杂质离子,浓度达到18%,真空浓缩至80%左右,放入结晶罐结晶,用冷水降温至35℃,结晶罐转速为10r/min—15r/min,缓慢降温结晶约15h,离心分离出L-苹果酸晶体,立即干燥,得到苹果酸晶体。Р五.物料衡算Р1.原料配比Р种子培养基(g/L):豆饼粉 6,蔗糖18,硝酸钠3,磷酸氢二钾1,氯化钾0.5,硫酸镁0.5 Р发酵培养基(g/L):延胡索酸115.8,蔗糖11.5,硫酸镁1.05,氯化铁0.07,浓磷酸1.16, 氨水1.58
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