活性及纯度检验:Р 1、SOD活性检验:SOD活性检验比较经典的方法是黄嘌呤氧化酶—细胞色素C法,简称CytC法:本法主要是有氧条件下,黄嘌呤氧化酶催化黄嘌呤或次黄嘌呤发生氧化反应生成尿酸,同时产生超氧阴离子,氧化型高铁CytC被超氧阴离子还原成亚铁CytC。后者在550纳米波长处有最大吸收。SOD抑制超氧阴离子对高铁CytC的还原,因而测定高铁CytC在加入SOD前后速度变化,可计算SOD的活力。在特定条件下引起高铁CytC还原速度50%的抑制所需SOD的量定为1个活力单位。Р 实验的条件为:高铁CytC10微摩尔/升,黄嘌呤50微摩尔/升,EDTA 100微摩尔/升,磷酸钾缓冲液50微摩尔/升,pH值为7.8,反应温度25℃,黄嘌呤氧化酶必须过量(5微摩尔/升)使CytC的吸收度变化为0.025/分。Р 本测定法是最早建立的一种SOD分析方法,至今仍被认为是一种可靠方法,不要求特殊仪器。Р 2、SOD纯度检验:SOD纯度可用聚丙烯酰胺凝胶电冰来测定其纯度,看其在分子量Р32000左右的一条带是否同标准品相同。Р (六)生产设备:Р 离心机 1台搅拌机 1台Р 搪瓷桶(20 升) 4只塑料桶(10 升) 4只Р 温度计(0~100℃) 1支分液漏斗(3 升) 4个Р 玻璃柱(3×40 厘米) 1根 pH试纸(1~14 ) 2本Р 天平 1台磅秤(50 千克) 1台Р 烧杯(1000 毫升、500 毫升、100 毫升) 各2只Р 量筒(1000 毫升) 2只Р (七)市场分析:Р 用动物血液生产SOD是比较经济的一种方法。动物血液不但来源广泛,价格便宜,而且也为废物利用提供了一条途径。目前国内生产SOD厂家少,而且原料分散,因此最适合小厂生产,处理1千克血液,除去成本,可净得10元左右。随着日化产品的发展及SOD在临床上的应用扩大,产品销路将日益增加,因此生产前景是乐观的。
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