可以获得大量的原生质体,而且几乎所有植物或它们的器官、组织或细胞均可用酶解法获得原生质体。缺点:这些酶制剂均含有核酸酶、蛋白酶、过氧化物酶以及酚类物质。用酶法降解细胞壁,会影响所获原生质体的活力。)Р37、、原生质体纯化有哪些方法?Р沉降法、漂浮法、不连续梯度法Р38、原生质体的培养方法有哪些,各有何优缺点?Р(1)固体培养法(平板培养法)(优点有利于对单个原生质体的胞壁再生和对细胞团形成的全过程进行定点观察。)Р(2)浅层液体培养法Р(3)双层培养法(优点:使培养基保持很好的湿度,不易干涸。同时还可以定期注入新鲜培养基。原生质体长壁速度和分裂速度很快。)Р39、影响原生质体培养的因素有哪些?简述原生质体培养的程序。Р(1)原生质体的活力(2)原生质体起始密度(3)细胞壁再生速度(4)培养基营养(5)培养条件(6)供试材料的基因型和生理状态Р原生质体分离——原生质体纯化——原生质体培养——原生质体胞壁再生——细胞团形成——器官形成、植株再生。Р40、试述植物细胞融合的程序。Р1、植物原生质体分离(l)双亲原生质体制备(2)采用酶法分离原生质体(3)影响原生质体活力的各种因素Р2、原生质体纯化(1)筛网过滤(2)采用不连续梯度法纯化原生质体(3)质膜稳定剂和渗透压稳定剂Р3、原生质体融合(l)盐融合法(2)高钙和高pH值法(3)聚乙二醇法(4)聚乙二醇和高钙、高pH值结合法(5)电融合法Р4、细胞杂种的选择(1)互补选择法:白化互补、遗传互补、营养互补(2)可见标志选择法:凹穴培养皿法、微吸管法Р5、愈伤组织形成器官分化植株再生(1)基本培养基筛选(2)激素种类和浓度调节(3)渗透压调节Р6、杂种植物鉴定(1)与亲代形态特征比较(2)杂种植物核型分析(3)同工酶谱分析Р41、植物细胞杂种选择的方法有哪几种?Р(l)互补选择法①白化互补选择法②遗传互补选择法③营养代谢互补选择法
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