。偶极离子在离子交换过程中的行为是很特殊的。现以氨基酸的离子交换为例。Р Р式中由于使用了钠型树脂,被吸附氨基酸的羧基所带的负电荷与树脂磺酸基之负电荷产生排斥力。这就是所谓偶极离子的排斥作用。因此使树脂对氨基酸的吸附量大大降低。Р四、问答题Р1、简述离子交换纤维素的特点有哪些?Р答:离子交换纤维素的特点是:离子交换纤维素为开放的长链骨架,大分子物质能自由地在其中扩散和交换,亲水性强,表面积大,吸易附大分子;交换基团稀疏,对大分子的实际交换容量大;吸附力弱,交换和洗脱条件缓和,不易引起变性;分辨力强,能分离复杂的生物大分子混合物。Р2、请以CM-C为例说明离子交换纤维素分离纯化蛋白质时的洗脱方法有哪些?并说出各种方法的洗脱原理。Р答:无论是升高环境的pH还是降低pH或是增加离子强度都能将被吸附物质洗脱下来。现以羧甲基纤维素为例加以说明,图中H2N-P表示蛋白质,C表示纤维素。Р Р(1)、升高环境的pH,使蛋白质在此pH下失去电荷,从而丧失与CM-C结合力而被洗脱下来。Р(2)、降低环境的pH,使CM-C在此pH下不解离,从而不能吸附蛋白质而被洗脱下来。Р(3)、用高浓度的同性离子根据质量作用定律将目的物离子取代下来。Р3、请以DEAE-C为例说明离子交换纤维素分离纯化蛋白质时的洗脱方法有哪些?并说出各种方法的洗脱原理。Р答:无论是升高环境的pH还是降低pH或是增加离子强度都能将被吸附物质洗脱下来。Р(1)、升高环境的pH,使DEAE-C在此pH下不解离,从而不能吸附蛋白质而被洗脱下来。Р(2)、降低环境的pH,使蛋白质在此pH下失去电荷,从而丧失与DEAE-C结合力而被洗脱下来。Р(3)、用高浓度的同性离子根据质量作用定律将目的物离子取代下来。Р4、由下图,利用给出的两种离子交换剂(E1,E2)分离3种蛋白质(P1、P2、P3),用箭头流程图表示(并指出E1,E2的类型)。
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