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植物的原生质体培养

上传者:火锅鸡 |  格式:ppt  |  页数:46 |  大小:4145KB

文档介绍
主要成分构成?纤维素25-50%、半纤维素53%和果胶5%РРРР一、植物原生质体的特点:??1、吸收能力增强:易于摄取外来遗传物质、细胞器、细菌、病毒等;易于吸收氧、养分;?2、具有全能性:具有全套的遗传物质,具有细胞壁再生并能进行人工培养分化发育成完整植株的能力;?3、在一定条件下可诱导原生质体融合,形成杂种细胞 。?4、分泌能力提高: 去除了细胞壁的扩散障碍,使细胞膜的透过性增强,利于胞内产物的分泌。?5、稳定性较差: 失去了细胞壁的保护作用,稳定性较差,易于受到渗透压等条件变化的影响。РРРР二、 原生质体的制备? 不同的植物细胞,由于细胞壁的组成、结构和性质有所不同,原生质体的制备方法也不一样。? 1、用于分离原生质体的材料准备:选取生长旺盛的细胞,幼嫩的组织。? 无菌试管苗叶片? 上胚轴和子叶? 培养细胞(愈伤组织)РРРР2、原生质体的分离? 1)、机械法:利刃机械切割? 2)、酶解法:果胶酶和纤维素酶处理РРРР1)机械法Р 1892年首先用于藻类分离原生质体? 做法:先使细胞质壁分离,再用刀把细胞壁切破,使原生质体流出或释放出来。РРРР 优点:该方法可避免酶制剂对原生质体的破坏作用。? 缺点:? 1) 手工操作难度大,原生质体得率低,费时费力,难以大量制备。? 2)能够用此法产生原生质体的植物种类受到限制。РРРР2)酶解法Р 1960年英国诺丁汉大学的科金第一次用酶解法从番茄幼苗根尖中大量制备出原生质体;? 常用酶:纤维素酶类、果胶酶类、半纤维素酶、蜗牛酶等;? 优点:条件温和、原生质体完整性好、活力高、得率高,而且几乎所有的植物或它们的器官组织或细胞均可用酶解法获得原生质体。? 缺点:酶制剂中均含有核酸酶、蛋白酶、过氧化物酶以及酚类物质,影响所获原生质体的活力。

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