技术克隆成功的,它在生物工程史上揭开了新的一页。6二、克隆技术的研究历史1938年,德国科家Spemman提出了将胚胎细胞核移植到去核卵母细胞中的构想。1952年,英国的Briggs和King利用蛙原肠胚以前的细胞核与去核蛙卵构建的重构胚克隆获得了成蛙;同时,他们还发现其原肠以后的细胞只能支持重构胚发育到一定程度,并据此认为胚胎细胞发育的能力,会随着胚胎的发育逐步下降。71962年,英国剑桥大学的Gurdon用囊胚细胞移植的方法获得了可繁殖的爪蟾,并再次证明成熟蛙已分化的细胞核,只能支持发育到蝌蚪,而不能发育成蛙。1963年,童第周等对鱼类胚胎细胞进行核移植技术,获得成功。哺乳动物胚胎细胞核移植研究的最初成果在1981年取得,卡尔.伊尔门泽(Illmensee)和彼得.霍佩(Hoppe)用小鼠囊胚的内细胞团细胞经核移植得到发育正常的小鼠。但其结果未被其他实验室重复出来。81983年,美国科学家McGrath和Solter利用显微操作技术结合电融合方法得到了克隆小鼠。可以说,这一工作真正拉开了哺乳动物克隆的序幕。1986年,英国的Willadsen报道用早期的胚胎细胞克隆出第一只羊。此后,其他科学家相继成功地克隆出牛(1987)、兔(1988)、猪(1989)。1996年,Campbell等报告用培养传代的羊胚盘细胞经无血清饥饿法使其进入G0期,移入卵母细胞后可正常发育到产仔。91997年2月,英国罗斯林研究所的Wilmut等利用5岁绵羊的乳腺上皮细胞进行核移植试验,并成功地获得了世界上第一只体细胞克隆绵羊“多莉(Dolly)”,这是克隆技术的一个新的里程碑。Wilmut博士等建立的一整套绵羊体细胞移植程序,如恢复体细胞核全能性的“血清饥饿法”、体细胞传代阶段的确定以及体细胞克隆后代与亲本核供体间的DNA微卫星分析等技术,成为全世界同行公认的哺乳动物细胞核移植的基本程序。10
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