Р2Р3Р我们从以下几方面来探讨植物体细胞杂交技术。Р发展历程Р70年代,技术建立和完善优化?1972年获得烟草种间体细胞杂种?1975年高Ca高pH加PEG融合方法,电融合法?大量成功报道,不少为异想天开的实验?80年代初,由模式植物转向农作物/经济作物,对称融合到非对称融合,创造新种质的技术手段?80年代末,大量木本植物细胞融合成功的报道?90年代至今,成为一种育种手段Р植物体细胞杂交的几个重要进展Р1960年,Kocking用酶法制备高等植物原生质体首次获得成功;?1971年,Takebe首次从离体烟草原生质体培养中获得再生完整植株;?1972年,Carlson首次获得粉蓝烟草和郎氏烟草的细胞杂种,这是第一个植物体细胞杂种;?1974年,Kao将聚乙二醇(PEG)诱导融合法应用于植物细胞融合并建立了相应的融合技术;?1978年,Melchers获得第一个属间体细胞杂种(番茄+马铃薯);?1981年,Zimmerman发明了电融合仪,并首次提出了电融合概念;?1987年,Schweiger建立了单对原生质体电融合技术程序。Р体细胞杂交的一般概念Р体细胞杂交,即原生质体融合,将两个不同亲本的原生质体,经人工诱导融合并培养再生成株的过程,统称为体细胞杂交(A + B)。Р根据概念,在理论上任何细胞都可能通过体细胞杂交而成为新的生物资源。这对于种质资源的开发和利用具有深远的意义。?融合过程不存在有性杂交过程中的种性隔离机制的限制,为远缘物种间的遗传物质交换提供了有效途径。?体细胞杂交产生的杂种细胞含有来自双亲的核外遗传系统,在杂种的分裂和增殖过程中双亲的叶绿体、线粒体DNA亦可发生重组,从而产生新的核外遗传系统。Р体细胞杂交步骤:Р1 原生质体的制备?2 原生质体的融合?3 杂种细胞选择?4 杂种细胞培养?5 由愈伤组织再生植株?6 杂种植株的鉴定Р植物体细胞杂交技术的过程:
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