目的Р?①菌种存活,不丢失,不污染??②防止优良性状丧失??③随时为生产、科研提供优良菌种Р二、菌种保藏的原理:Р首先,选用优良的纯种(最好是休眠体,如分生孢子、芽胞等)Р其次,创造微生物代谢不活波,生长繁殖受抑制,难以发生突变的环境条件(其环境要素是干燥、低温、缺氧、缺营养以及添加保护剂等)?Р再次,添加保护剂或酸碱中和剂,避免保藏过程中细胞受伤。Р三、菌种保藏的方法Р斜面保藏法?穿刺保藏法?沙土管干燥保藏法?真空冷冻保藏法?液氮保藏法?低温保藏法Р斜面低温保藏法Р方法:接种适宜斜面培养基→培养→4℃保藏?原理:低温下,微生物代谢强度明显下降?适用:各大类?保藏期:3-6个月?缺点:保存期短,传代多,易退化Р半固体穿刺保藏法Р方法:适宜半固体→培养→4℃保藏?原理:缺氧、低温?适用:好气性细菌,酵母等?保藏期:6-12个月?步骤:? 用接种针从原菌种斜面上挑取少量菌体,从柱状培养基中心自上而下刺入,至培养基的1/2处,待微生物生长良好后覆盖2-3mm无菌液体石蜡.石蜡可防止培养基失水又隔绝氧气,降低代谢.但不适用于可以石蜡为碳源的微生物.Р砂土管干燥保藏法Р方法:将干燥砂粒与细土混合后灭菌制成砂土管,然后接种保藏。?原理:无营养,缺氧,干燥?适用:产孢子的丝状真菌、放线菌;有芽孢的细菌?保藏期:2-10年或更长Р河沙Р60目筛Р弃去大颗粒及杂质Р80目筛Р去掉细沙Р吸铁石Р吸去铁质Р10%~20%的? 盐酸浸泡24hР去除有机物Р水洗至中性Р烘干或晒干Р土:取地面下40~60cm非耕作层贫瘠且粘性较小的土,研碎,100目过筛,? 水洗至中性,烘干。? ? 将处理后的沙、土按质量比2∶1混合。混匀的沙土分装入安瓿管或小试管中,高度为1cm左右,塞好棉塞,121℃高压间歇灭菌2-3次,烘干备用。? 孢子或芽孢悬液→加入无菌砂土管中→干燥→封口? → 4-6℃保藏Р步骤:Р沙:
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