同的处理方法。Р新柱使用前的冲洗Р新柱在使用前应先认真阅读说明书及性能测试报告,了解柱子的性能指标。分析用的流动相往往与柱子的保存试剂不同,故在分析样品之前,应使用合适的试剂将柱子中的保存试剂清洗出来。要注意清洗用的流动相与保存溶剂的相溶性。?1、反相柱如岛津C18、C8等柱保存在70%甲醇中,可用10~20倍柱体积的甲醇或乙腈来平衡色谱柱。流速应缓慢提高,如开始0.3mL/min,10~15min后可慢慢加快。Р新柱使用前的冲洗Р2、正相柱或称极性色谱柱一般保存在正庚烷或正己烷中。如果分析时的流动相含有极性溶剂,应使用乙醇或异丙醇冲洗,流速0.1~0.3mL/min ,将保存液冲洗干净后,再用流动相平衡。?3、钙柱等糖柱只能用纯水作流动相进行冲洗,有机溶剂会造成色谱柱损坏,尤其要注意。?冲洗后可以记录色谱柱的一些性能指标,如柱效、柱压等,供今后参考。分析样品前,要用流动相对色谱柱进行平衡,待基线平稳后再进样分析。一般用流动相平衡的时间为30min,若系统中有盐或水,平衡时间应延长。Р反相柱日常清洗Р色谱柱清洗是日常的重要维护工作。分析工作结束后,要用适当的溶剂清洗系统中残留的样品。在反相系统中, 若流动相中无酸、碱、盐类物质, 可用甲醇冲洗30~60min ;若含酸、碱、盐类物质,应先用10 %甲醇,或用与分析用流动相相同比例的不含酸、碱、盐的溶液,冲洗30~60min , 再用甲醇冲洗。直接用纯甲醇冲洗,会导致缓冲盐沉淀于柱子或检测池中。Р反相柱日常清洗Р关于纯水的问题:纯水极性很强,ODS等填料的硅烷键是非极性的,在纯水中各键合基团会因疏水作用而改变空间构型, 使柱效很快降低。很多公司推出可以使用100%纯水进行冲洗的柱子,原理是键合基团互相之间有排斥力,这类柱子一般键合相比较丰富,游离硅羟基比较少,从而阻止了键合基团性能的改变。能否用纯水冲洗要参考该色谱柱的说明书。
全文预览
