?(3)采样方法: 用5cm×5 cm的标准灭菌规格板,放在被检物体表面,用浸有灭菌9g/L氯化钠溶液的棉拭子1支,在规格板内横竖往返各涂抹5次,并随之转动棉拭子,连续采样式1~4个规格板面积,剪去手接触部分,将棉拭子入装10ml采样液的试管内送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样。Р哦Р一、采样及检查原则:Р(4)细菌菌落总数检查: 1ml采样液放入灭菌平皿内,用普通营养琼脂作倾注培养,放35℃温箱内培养24~48 h计数菌落。?物体表面细菌菌落总数(cfu/ cm2)= 平板上菌落数×采样液稀释倍数÷?采样面积(cm2)Р一、采样及检查原则:Р4、使用中消毒剂和无菌器械保存液的微生物学监测?(1) 采样时间: 采取更换前使用中的消毒剂与无菌器械保存液。?(2 ) 采样量及方法: 在无菌条件下,用无菌吸管吸取1ml被检样液,加入到9ml稀释液中混匀。醇类和酚类消毒剂用普通营养肉汤作稀释液。含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒液需在肉汤内加入0.1%硫代硫酸钠作稀释液。季铵盐类消毒液需在肉汤中加入3% Tween 80和0.3%卵磷脂作稀释液。含有表面活性剂的各种复方消毒剂需在肉汤中加入3%Tween 80作稀释液。常用消毒剂的中和剂见表6-3-2。Р一、采样及检查原则:Р(3) 细菌菌落总数检查:分别取1ml采样液放入2只灭菌平皿内,用普通营养琼脂作倾注培养,将其中一只平板置20℃培养7d,观察真菌生长情况;另一平板放37℃温箱内培养72 h计数菌落。平板上有菌生长,证明被检样液有残存活菌,若每个平板菌落数在10个以下,仍可用于消毒处理(但不能用于灭菌);若每个平板菌落数超过10个,说明每毫升被检样液含菌量已超过100个,不宜再用。?(4)判断标准:使用中消毒剂,细菌菌落总数≤100 cfu/ ml,病原微生物不得检出;无菌器械保存液必须无菌。
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