工程方面具有广阔的临床应用前景。从人脐带中分离出MSCs,细胞含量、增殖能力优于骨髓MSCs,免疫原性比骨髓MSCs低,并且具有取材方便,无伦理学争议等优点,因此越来越受到研究工作者们的关注。Р培养方法Р酶消化法Р组织块贴壁法Р酶消化法Р去除血管,将脐带组织剪成1~3cm大小组织块,用无血清培养基洗2次,将组织浸泡在0.1%胶原酶中,37℃消化4~6小时。加入生理盐水(消化液体积的2倍),2000r/min离心5min,弃上清,加入2.5%胰蛋白酶,37℃处理30min,加入生理盐水(消化液体积的2倍),100目滤网过滤,滤液2000r/min离心5min,弃上清。重复两次。细胞计数,将细胞调成一定浓度用于培养。Р组织块贴壁法Р取新鲜健康脐带,用PBS冲洗干净后,用剪刀镊子剔去血管,剥出里面的华通氏胶,将所得组织充分剪碎至1 mm^3大小,加入α-MEM培养液置于37℃,5%的CO2培养箱培养,培养液中含10% FBS,100U/ml青霉素,100U/ml链霉素。脐带组织培养5-7天后,可见有部分细胞从组织块周围爬出,形态呈细小的梭形,一周后,细胞开始迅速增殖,形成大小不等的细胞集落。Р脐带间充质干细胞扩增培养方法Р 采用无血清培养基(可含10%受者灭活血清)将细胞调成悬液,按2×10^4/cm^2接种于培养瓶, 37℃、5%的CO2条件下培养4d后全量换液,吸弃非贴壁细胞。每3d换液,细胞覆盖瓶底80%时,0.25%胰蛋白酶-1mmol/L EDTA消化,按1:3传代。培养3周左右,胰酶消化细胞,细胞悬液2000r/min离心5min,弃上清后加入生理盐水混匀,2000r/min离心5min,重复2次。Р脐带间充质干细胞在临床上的应用Р1.能具有较强的免疫调节作用,可用于治疗红斑狼疮和硬皮病等自身免疫性疾病,降低细胞或器官移植后的免疫排斥反应,提高细胞或器官移植的成功率。
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