病原学检查技术Р一、细菌性传染病病原检查Р1、显微镜检查法?2、培养检查法?3、生化试验?4、动物试验? 皮下接种、腹腔接种、肌肉接种、静脉注射Р二、病毒性传染病病原检查Р1、病毒分离培养?(1)样品处理? 将检疫材料制成混悬液,加入抗生素,离心取上清液?(2)鸡胚接种?(3)动物组织培养Р鸡胚接种技术Р鸡胚的结构Р气室Р鸡胚Р卵黄囊Р尿囊腔Р羊膜腔Р绒毛尿囊膜Р卵白Р卵膜Р鸡胚的管理?(一)鸡胚的选择?首选健康受精卵,其壳洁白易于观察胚胎,其他受精卵也可使用。接种病毒的受精鸡卵应未感染已知病毒或其它微生物(如新城疫病毒或支原体等),最好来自无特定病原体(specified-pathogens free,SPF)鸡群,接种立克次体的受精鸡卵应来自未食用高浓度抗生素的鸡群。Р鸡胚接种技术Р检卵? 在发育的早期,鸡胚不易辨认,要到4-5天后才容易看见。因此,检卵要在孵育4-5天后进行。活的鸡胚绒毛尿囊膜界线较明显,上面的血管清晰可见、成网状,可看到明显的胚胎自主运动。如果胚胎活动呆滞或不能自主运动,血管模糊、变细、折断脱落,绒毛尿囊膜界线模糊,说明鸡胚已濒临死亡或已经死亡。Р鸡胚接种技术Р接种前后都要检卵。接种前检卵是要了解鸡胚的存活情况,标记气室边界和胚胎位置;接种后检卵是为了观察接种后胚胎的状况。Р鸡胚接种技术Р(一)材料准备?1、受精鸡卵?2、孵卵箱或恒温箱?3、捡卵灯,照卵灯?4、砂轮、三棱针?5、卵盘、卵杯?6、其它:1ml注射器,针头,2.5%碘酒,75%酒精,镊子,无菌生理盐水,毛细吸管,橡胶吸头,液体石蜡,蜡和胶布等。Р鸡胚接种技术