33~40℃条件下生长发育,热处理之后立即把茎尖切下来嫁接到无病砧木上。? 3. 局限性:只对球状、线状病毒有效,对杆状病毒不起作用。Р(二)茎尖培养脱毒?1. 原理? 病毒在植物体内的分布是不均匀的。老叶片及成熟的组织和器官病毒含量较高,而幼嫩的及未成熟的组织或器官病毒含量较低,生长点(0.1~1.0 mm区域)则几乎不含或含病毒很少。? 在植物体内,病毒易于通过维管系统而移动,但在分生组织中不存在维管系统,病毒在细胞间移动的另一途径是通过胞间连丝,但是速度很慢,难以追赶上活跃生长的茎尖。? 在旺盛分裂的分生细胞中,代谢活性很高,使病毒无法进行复制。? 在分生组织中病毒钝化系统比其它区域都具有更高的活性,因而分生组织不受侵染。? 在茎尖中存在高水平的内源生长素,可以抑制病毒的增殖。Р2. 方法?(1)材料的准备? 一般说来,带有叶原基的茎尖易于培养,成苗快,培养时间短,要获得无病毒植株,理论上茎尖越小越好,实际应用时,根据病毒种类不同切取0.1~1mm大小的生长点,即可获得无病毒植株,外植体越小,培养难度越大,或者时间越长。Р生长素类物质如IAA、IBA、NAA、2,4-D等具有促进新梢生长的显著作用,并可诱导外植体产生愈伤组织和生根。往往低浓度的生长素与细胞分裂素配合可以达到促进芽增殖,提高繁殖效果的作用。? 百合 MS+BA 0.5~1.0mg/L+NAA 0.5mg/L? 苹果 MS+BA 0.5~1.0mg/L+GA3 0.1~0.5mg/L +IBA 0.2~0.5mg/LР(三)热处理结合茎尖培养脱毒?(四)微体嫁接脱毒? 微体嫁接是组织培养与嫁接方法相结合来获得无病毒苗木的一种技术。它是将0.1~0.2mm的茎尖作为接穗,嫁接到由试管中培养出来的无菌室生砧木上,继续进行试管培养,愈合成为完整的植株。?(五)愈伤组织培养脱毒?(六)抗病毒药剂脱毒---抗病毒醚
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