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病毒包装与感染课件

上传者:苏堤漫步 |  格式:ppt  |  页数:40 |  大小:3236KB

文档介绍
因病毒基因组整合于宿主基因组, 长时间、稳定表达外源基因表达丰度高中中表达时间快(1-2 天)慢( 2-4 天) 快( 1-2 天) 感染细胞类型分裂和不分裂细胞分裂和不分裂细胞。适用于难转染细胞感染分裂细胞,在干细胞中表达效率低滴度 TU/ml 10 12109 /10 1010 9/10 8 毒性作用细胞毒性遗传毒性遗传毒性腺病毒载体慢病毒载体逆转录病毒载体免疫原性高免疫原性低免疫原性低免疫原性安全系数高高中 MIRCORNA 可以可以不可以 RNAi 病毒进入细胞往往引起细胞内干扰素反应,不适合做RNAi 实验适合,是 RNAi 实验的优选工具可以用作 RNAi 实验基因过表达包装容量较大。可以满足较大基因的包装,是过表达基因的优选工具包装容量有限,过表达的基因过大时,病毒滴度受到影响包装容量有限,过表达的基因过大时,病毒滴度受到影响优势几乎可以感染所有类型细胞,病毒滴度高,感染宿主范围较广,生物安全性高适合体内实验中难于转染的细胞如神经元细胞、干细胞和其它原代细胞外源基因表达水平较高,可实现目的基因的稳定长期表达常见应用 1、体外细胞基因转导 2、基因治疗 1、体外细胞基因转导 2、基因治疗 1、体外细胞基因转导 2、全基因组插入失活突变筛选 3 、功能基因库构建腺病毒载体?无包膜的线状双链 DNA 病毒,宿主范围很广,适用于在分裂或非分裂哺乳动物细胞中进行高效瞬时表达。?除了一些抗腺病毒感染的淋巴瘤细胞,腺病毒系统可以在任何哺乳动物细胞中高效瞬时表达,是可靠的基因递送平台。它在感染宿主细胞时,病毒基因组及其携带的外源基因独立于宿主基因组外游离表达,因此是无插入突变性, 安全性高。?腺病毒载体的外源基因装载量较大,表达速度快,可获得高滴度的病毒。可产生 10 8 pfu/ml 原液,浓缩后可达 10 10- 10 11VP/ml ,被广泛应用于基础研究和基因治疗中。

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