过多成熟的红细胞和标本的严重凝固,需处理,淋巴细胞分离液或低渗方法可去除红细胞,凝固的积液将凝块吸出,剩余液体离心涂片。 2017-2-5 6二、涂片制作二、涂片制作(一)要求: 1 标本要新鲜 2 操作要轻柔:细胞分布均匀;薄厚适当勿挤压摩擦,以免细胞损伤变形; 3 玻片要清洁 4 涂片要牢固 5 涂片数量 6 标号准确 2017-2-5 7(二)涂片制备方法(二)涂片制备方法?推片法?涂抹法?压拉涂片法?吸管推片法?喷射法?印片法 2017-2-5 8(三)涂片的固定(三)涂片的固定?目的: 保持细胞形态结构,防止其自溶。?固定液: 首选 95 %酒精,乙醇乙醚,氯仿乙醇?注意事项: 巴氏染色,涂片勿在空气中干燥后染色;固定时间不短于 15 分钟( 48h 内进行巴氏染色);固定液要达到 90 %以上;液体标本离心后涂片,待潮干后再固定,宫颈的刮片、痰涂片、拉网涂片、内窥镜的刷片、针吸涂片应立即固定。 2017-2-5 9 ?固定方法:带湿固定干燥固定?固定时间: 15~ 30min (四)涂片的染色目的: 使细胞结构清晰显示;应用各种染色使细胞浆与核恰当显示不同颜色;使细胞透明度高, 结构清晰。方法: 常规染色为巴氏染色,配合 HE 、 Giemsa 、特染等。 2017-2-5 10 1 巴氏染色法?水化: 固定好的涂片→80%、 70%、 50%乙醇→蒸馏水各1min ?染核: 苏木素染 3~5min ?分色: 1%盐酸中数秒,水洗?蓝化: 置饱和碳酸锂溶液中 1min ,水洗?脱水: 50%、 70%、 80%、 95%乙醇各 1min ?染浆: 置于橘黄 G液中染 2~4min →95%乙醇洗 2次→置于 EA 36染液中 4~ 5min ?脱水: 95 %、无水乙醇各 1~ 2min →二甲苯透明 2~ 3min ×2?封片: 中性树胶封固
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