的肽、鼠和人的抗SARS.CoV单克隆抗体及一些抗病毒复合物及小分子物质如组织蛋白酶L、毛地黄黄酮、胺碘达隆及小分子干扰RNA(siRNA) 1191。SARS.CoV棘突蛋白研究为HCoV-NL63棘突蛋白研究提供了非常有用的信息与思路。有研究报道眩们:基于SARS.CoV重组核衣壳蛋白(rN)的IgG ELISA比基于重组的棘突蛋白(rS)的IgG ELISA敏感性高;但是,基于重组的棘突蛋白(rS)的IgM ELISA比基于重组核衣壳蛋白(rN)的IgM ELISA敏感度高;SARS.CoV感染的血清学检测中,同时检测两种蛋白的IgM的ELISA敏感性要高于单独检测N蛋白的敏感性,但是同时检测两种蛋白的IgG的ELISA敏感性并不高于单独检测N蛋白的敏感性,这些都为HCoV-NL63棘突蛋白应用于实验室诊断抗原的研究奠定了坚实的基础。此外,抗病毒药物研究也提示 HCoV-NL63棘突蛋白是有前景的特异性抗病毒药靶‘21’脚。链亲和素(SA)是由链霉菌分泌的一种非糖基化同源四聚体蛋白,故一个链亲和素可结合四个生物素。它与生物素紧密非共价结合(Kd=10d5 M),结合力是抗原一抗体间作用力的一千至一百万倍。由于链亲和素可与生物素发生快速且几乎不可逆的强力结合,而且生物素化的抗体及其酶标二抗应用已经成熟,通过添加特异底物时酶催化的成色反应达到检测未知的抗原或者抗体分子的作用。痘苗病毒是一种双链的DNA病毒,基因组全长大约180kb。痘苗病毒天坛株在五十多年前就被成功的用于消灭天花,并且极少出现严重的副作用。通过同源重组的方法可以将较长的DNA片段插入痘苗病毒基因组而不破坏病毒的整合。痘苗病毒载体已经用于多种病原体的糖蛋白四之61表达及功能分析,亦可直接应用于诊断抗原的制备及疫苗的研发。本研究分为三个部分。第一部分,克隆合成HCoV-NL63 Spike蛋白四个功能区基因。
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