物细胞融合的意义:克服了远缘杂交的不亲和性,成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。3、动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较:(重点记忆)细胞工程植物体细胞杂交动物细胞融合理论基础细胞的全能性、细胞膜的流动性细胞增殖、细胞膜的流动性融合前处理酶解法去除细胞壁(纤维素酶、果胶酶)注射特定抗原,免疫处理正常小鼠诱导手段物理法:离心、振动、电激化学法:聚乙二醇(PEG)物理法:离心、振动、电激化学法:聚乙二醇生物法:灭活的病毒(灭活的仙台病毒)诱导过程第一步:原生质体的制备(酶解法)第二步:原生质体融合(物、化法)第三步:杂种细胞的筛选和培养第四步:杂种植株的诱导与鉴定正常小鼠免疫处理动物细胞的融合(物、化、生法)杂交瘤细胞的筛选与培养专一抗体检验阳性细胞培养单克隆抗体的提纯用途和意义克服远缘杂交的不亲和障碍,大大扩展杂交的亲本组合范围应用:白菜-甘蓝等杂种植株制备单克隆抗体诊断、治疗、预防疾病,例如“生物导弹”治疗癌症4.单克隆抗体(1)a.抗体:一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差。b.B淋巴细胞特点:可以产生抗体,但不能无限增殖;骨髓瘤细胞特点:能无限增殖,但不能产生抗体。(2)单克隆抗体的制备过程:注入小鼠细胞融合分离抗原注入小鼠体内B淋巴细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞细胞培养养选择培养细胞培养基体内培养体外培养从腹水提取从培养液提取单克隆抗体(3)杂交瘤细胞的特点:既能大量繁殖,又能产生专一的特异性抗体。(4)单克隆抗体的优点:特异性强,灵敏度高,并能大量制备。(5)单克隆抗体的作用:①作为诊断试剂:准确识别各种抗原物质的细微差异,并跟一定抗原发生特异性结合,具有准确、高效、简易、快速的优点。②用于治疗疾病和运载药物:主要用于治疗癌症治疗,可制成“生物导弹”(连接上抗癌药物的单克隆抗体),也有少量用于治疗其它疾病。
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