胞:用适当的方法将形成的重组 DNA 分子转移到合适的受体细胞中。常用的受体细胞有大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌和动植物细胞等。如用质粒作载体,宿主细胞应选择大肠杆菌,用氯化钙处理大肠杆菌,增加大肠杆菌细胞壁的通透性(感受态细胞),使含有目的基因的重组质粒进入大肠杆菌宿主细胞。第四步:筛选含有目的基因的受体细胞:并不是所有细胞都接纳了重组 DNA 分子,因此需要筛选含有目的基因的受体细胞。例如,质粒上有抗生素如四环素的抗性基因,所以含有这种重组质粒的受体细胞就能够在有四环素的培养基中生长,而没有接纳重组质粒的细胞在这种培养基中不能生长。这样就能筛选出含有重组 DNA 分子的受体细胞。第五步:目的基因的表达:目的基因在宿主细胞中表达,能产生人们需要的功能物质。Р1.植物的克隆:Р?第二章:克隆技术(1)——植物克隆Р(1)理论基础:植物细胞的全能性Р(2)技术基础:植物组织培养Р(3)主要技术:植物细胞培养;植物器官培养;原生质体培养Р2.细胞全能性Р(1)植物细胞全能性基本含义:指植物体的每个活细胞都具有遗传上的全能性,因而都具有发育成完整植株的潜能。Р(2)原因:因为每个植物细胞含有这种植物生长、发育的全套基因。Р(3)差异:不同植物或同种植物不同基因型个体的细胞全能性有差异。Р(全能性比较:受精卵>早期胚胎细胞>生殖细胞>体细胞;植物细胞>动物细胞)Р3.植物组织培养程序Р(1)概念:植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下,将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、生芽,最终形成完整的植株。Р(2)过程:离体的植物器官、组织、细胞¾脱¾分¾化® 愈伤组织¾¾再分¾化® 根芽® 植物体Р愈伤组织:一种相对没有分化的活的薄壁细胞团组成的新生组织。脱分化:已经高度分化的植物细胞,经过诱导重新恢复了分裂能力,产生愈伤组织的过程。
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